Государственное
санитарно-эпидемиологическое нормирование
Российской Федерации
4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ
Измерение концентраций диэтиламмониевой соли метиоприла методом высокоэффективной жидкостной хроматографии в воздухе рабочей зоны
МУК 4.1.228-96
Минздрав России
Москва 2000
1. Методические указания по измерению концентрации вредных веществ в воздухе рабочей зоны (выпуск 30) разработаны с целью обеспечения контроля соответствия фактических концентраций вредных веществ их предельно допустимым концентрациям (ПДК) и ориентировочно безопасным уровням воздействия (ОБУВ) - санитарно-гигиеническим нормативам и являются обязательными при осуществлении санитарного контроля.
2. Методические указания по измерению концентраций вредных веществ в воздухе рабочей зоны утверждены и. о. Председателя Госкомсанэпиднадзора России - заместителем Главного государственного санитарного врача Российской Федерации 8 июня 1996 г.
3. Введены впервые.
4. Включенные в данный выпуск 74 методики контроля вредных веществ в воздухе рабочей зоны разработаны и подготовлены в соответствии с требованиями ГОСТа 12.1.005-88 ССБТ "Воздух рабочей зоны. Общие санитарно-гигиенические требования", ГОСТа 12.1.016-79 ССБТ "Воздух рабочей зоны. Требования к методикам измерения концентраций вредных веществ" и ГОСТа Р 1.5-92 п. 7.3.
Методические указания одобрены на совместном заседании группы Главного эксперта Федеральной комиссии по санитарно-гигиеническому нормированию "Лабораторно-инструментальное дело и метрологическое обеспечение" и методбюро п/секции "Промышленно-санитарная химия" Проблемной комиссии "Научные основы гигиены труда и профпатологии".
Ответственные исполнители: Г. А. Дьякова, C. И. Муравьева
Исполнители: Г. А. Дьякова, Н. С. Горячев. Л. Г. Макеева, Г. В. Муравьева, Е. М. Малинина, Е. В. Грыжина, Е. Н. Грицун.
УТВЕРЖДЕНО
И. о. Председателя Госкомсанэпиднадзора
России - заместителем Главного
государственного санитарного врача
Российской Федерации
Г.Г. Онищенко
8 июня 1996 г.
МУК 4.1.228-96
Дата введения: с момента утверждения
4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ
Измерение концентраций диэтиламмониевой соли метиоприла методом высокоэффективной жидкостной хроматографии в воздухе рабочей зоны
Диэтиламмониевая соль метиоприла
С16Н30N2O4S М. м. 346,49
Лекарственный препарат с антигипертензивными свойствами. Твердое кристаллическое вещество кремового цвета без запаха.
Тпл. - 119-121 °С. Хорошо растворимо в воде, плохо растворимо в эфире, ацетоне.
В воздухе присутствует в виде аэрозоля.
Диэтиламмониевая соль метиоприла не оказывает раздражающего действия на слизистую оболочку и кожу.
ОБУВ в воздухе 3 мг/м3.
Характеристика метода
Определение основано на концентрировании аэрозоля диэтиламмониевой соли метиоприла на фильтре, экстракции этого вещества из фильтра водой и анализе методом жидкостной хроматографии со спектрофотометрическим детектированием.
Нижний предел обнаружения диэтиламмониевой соли метиоприла в анализируемой пробе (10 мкл) - 0,1 мкг (10 мкг/мл).
Нижний предел обнаружения диэтиламмониевой соли метиоприла в воздухе рабочей зоны - 1 мг/м3 (при объеме пробы воздуха 10 л).
Диапазон определения концентраций диэтиламмониевой соли метиоприла 1-10 мг/м3.
Определению мешает метиоприл.
Погрешность метода - ± 19 %.
Длительность анализа, включая пробоотбор, - 50 мин.
Приборы, аппаратура, посуда
|
Микроколоночный жидкостный хроматограф "Милихром", среднее квадратичное отклонение выходных сигналов которого не превышает 3 % во всем диапазоне чувствительности |
|
|
Колонка типа КАХ-2-64-3 |
ТУ 25-7405.003-86 |
|
Иономер универсальный типа ЭВ-74 с погрешностью измерения не более 0,05 рН (допускается применение рН-метров с аналогичными метрологическими характеристиками) |
|
|
Водоструйный насос |
ГОСТ 25336-82 |
|
Электроаспиратор с расходомером ЭА-1 |
ТУ 25-11.1414-78 |
|
Весы лабораторные общего назначения, 2-го класса точности с наибольшим пределом взвешивания 200 г |
|
|
Аппарат для встряхивания пробирок АВ-30С |
|
|
Испаритель вакуумный типа ЭРА-М |
|
|
Колба 2 (1)-50, 500, 1000-2 |
ГОСТ 20292-74 |
|
Пипетки 4(5)-1-(2); 6(7)-1-5(10) |
ГОСТ 20292-74 |
|
Пробирки П 1-16-150 ХС |
ГОСТ 25336-82 |
|
Цилиндры 1 (2, 3, 4)-50, 100 |
|
|
Пробирки резиновые конусные по действующей НТД |
|
|
Фильтр ФКВ-60-ПОР 250 ХС |
ГОСТ 25336-82 |
|
Фильтродержатель с мембранным капроновым фильтром (25 мм, 0,2 мкм, МО КНПО "Диагностикум") |
|
Реактивы и материалы
|
Калий фосфорнокислый двузамещенный, ч. д. а. |
ГОСТ 2493-75 |
|
Метанол, яд, ос. ч. |
ТУ 6-09-14-2192-85 |
|
Диэтиламмониевая соль метиоприла, содержание основного вещества 90 % |
|
|
Ортофосфорная кислота, ос. ч. концентрированная |
ГОСТ 6552-80 |
|
Вода дистиллированная |
|
|
Спирт изопропиловый, х. ч. |
ТУ 6-09-402-81 |
|
Спирт этиловый, ректификованный |
ГОСТ 18300-87 |
Допускается применение импортной лабораторной посуды, аппаратуры и реактивов по качеству не ниже отечественных.
Отбор пробы воздуха
С помощью электроаспиратора через фильтр, закрепленный в фильтродержателе, в течение 10 мин пропускают 10 л воздуха со скоростью 1 л/мин.
Экспонированный фильтр помещают в бюкс и хранят до анализа в холодильнике не более недели.
Подготовка к измерению
Приготовление 0,05 М раствора калия фосфорнокислого двузамещенного, рН = 4,2.
Для приготовления раствора навеску 11,6 г калия фосфорнокислого двузамещенного переносят в мерную колбу, вместимостью 1000 мл, растворяют в небольшом количестве воды и доводят рН раствора до 4,2 добавкой концентрированной ортофосфорной кислоты, добавляют дистиллированную воду до метки. Раствор хранят в холодильнике до полного использования.
Элюент: 40 мл метанола смешивают с 60 мл 0,05 М раствора калия фосфорнокислого двузамещенного, рН = 4,2. Элюент хранят в холодильнике в течение месяца.
Исходный и градуировочный растворы диэтиламмониевой соли метиоприла готовится 100 мл исходного раствора диэтиламмониевой соли метиоприла с массовой концентрацией 0,2 г/л. В качестве растворителя используют элюент.
Разбавлением исходного раствора диэтиламмониевой соли метиоприла готовят калибровочные растворы с массовыми концентрациями 10, 20, 40, 60, 80 и 100 мкг/мл.
Подготовка исследуемого образца к анализу
Фильтр с осажденной на него диэтиламмониевой солью метиоприла помещают в пробирку с 3 мл этилового спирта и встряхивают в течение 5 мин. Раствор декантируют, пробирку с фильтром еще 2 раза встряхивают с 2 мл этилового спирта. Экстракты объединяют, фильтруют через стеклянный фильтр и упаривают досуха на вакуумном испарителе. Осадок растворяют в 1 мл элюента и используют для анализа. При необходимости делают разведение для получения удобно обсчитываемых пиков диэтиламмониевой соли метиоприла на хроматограммах.
Подготовка колонки к проведению анализа
Колонку промывают изопропиловым спиртом (2,5 мл), затем дистиллированной водой (2,5 мл) и элюентом до установления стабильной базовой линии. Скорость потока - 100 мкл/мин.
Все используемые жидкости должны быть предварительно дегазированы.
Для построения градуировочного графика используют свежеприготовленные калибровочные растворы. 10 мкл каждого градуировочного раствора диэтиламмониевой соли метиоприла вводят в колонку хроматографа и проводят анализ при следующих условиях:
|
температура колонки |
20 °С; |
|
скорость потока элюента |
100 мкл/мин; |
|
длина волны детектора |
230 нм; |
|
чувствительность детектора |
0,8 А; |
|
скорость диаграммной ленты |
0,6 см/мин; |
|
время удерживания диэтиламмониевой соли метиоприла |
6,3 мин; |
|
объем удерживания |
0,63 см3. |
Измеряют площади пика диэтиламмониевой соли метиоприла на полученных хроматограммах. На основании проведенных измерений строят калибровочный график (для каждой новой колонки) в координатах: по оси абсцисс - концентрация диэтиламмониевой соли метиоприла в растворе (мкг/мл), по оси ординат - площадь пика диэтиламмониевой соли метиоприла (мм2). Каждую точку получают на основании 6 измерений. При использовании одной колонки калибровочный график проверяют не реже одного раза в квартал.
Проведение измерений
В колонку хроматографа вносят 10 мкл подготовленного раствора анализируемого образца и проводят анализ при условиях, описанных в разделе "калибровка". В случае получения очень большого пика диэтиламмониевой соли метиоприла, выходящего за пределы шкалы самописца, анализ повторяют, предварительно приготовив разведение анализируемого раствора образца, или наносят на колонку хроматографа меньшее количество неразведенного раствора.
Вычисляют площадь пика диэтиламмониевой соли метиоприла для каждого анализа (не менее 5) и находят среднеарифметическую величину, по которой определяют концентрацию диэтиламмониевой соли метиоприла в растворе по градуировочному графику.
Расчет концентрации
Концентрацию диэтиламмониевой соли метиоприла (С) в воздухе рабочей зоны (мг/см3) вычисляют по формуле:
, где
а - концентрация диэтиламмониевой соли метиоприла в анализируемой пробе; определяют по градуировочному графику, мкг/мл;
в - конечный объем экстракта из фильтра, мл;
V - объем воздуха, отобранного для анализа и приведенного к стандартным условиям, л (см. приложение 1).
Методические указания разработаны НИИ медицины труда РАМН, НПО «Биотехнология», г. Москва.
Приложение 1
Приведение объема воздуха к стандартным условиям (температуре 20 °С и давление 760 мм рт. ст.)
Приведение объема воздуха к стандартным условиям проводят по формуле:
, где
Vt - объем воздуха, отобранного для анализа, л;
Р - барометрическое давление, мм рт. ст. (760 мм рт. ст. = 101,33 кПа);
t° - температура воздуха в месте отбора пробы, °С.
Для удобства расчета Vст следует пользоваться таблицей коэффициентов (приложение 2). Для приведения объема воздуха к температуре 20 °С и давлению 760 мм рт. ст. (101,33 кПа) надо умножить Vt на соответствующий коэффициент.
Приложение 2
Коэффициент К для приведения объема воздуха к стандартным условиям
|
Давление Р, кПа/мм рт. ст. |
||||||||||
|
°С |
730 |
734 |
738 |
742 |
746 |
750 |
754 |
758 |
760 |
764 |
|
-30 |
1,1582 |
1,1646 |
1,1709 |
1,1772 |
1,1836 |
1,1899 |
1,1963 |
1,2026 |
1,2058 |
1,2122 |
|
-26 |
1,1393 |
1,1456 |
1,1519 |
1,1581 |
1,1644 |
1,1705 |
1,1768 |
1,1831 |
1,1862 |
1,1925 |
|
-22 |
1,1212 |
1,1274 |
1,1336 |
1,1396 |
1,1458 |
1,1519 |
1,1581 |
1,1643 |
1,1673 |
1,1735 |
|
-18 |
1,1036 |
1,1097 |
1,1158 |
1,1218 |
1,1278 |
1,1338 |
1,1399 |
1,1400 |
1,1490 |
1,1551 |
|
-14 |
1,0866 |
1,0926 |
1,0986 |
1,1045 |
1,1105 |
1,1164 |
1,1224 |
1,1284 |
1,1313 |
1,1373 |
|
-10 |
1,0701 |
1,0760 |
1,0819 |
1,0877 |
1,0986 |
1,0994 |
1,1053 |
1,1112 |
1,1141 |
1,1200 |
|
-6 |
1,0540 |
1,0599 |
1,0657 |
1,0714 |
1,0772 |
1,0829 |
1,0887 |
1,0945 |
1,0974 |
1,1032 |
|
-2 |
1,0385 |
1,0442 |
1,0499 |
1,0556 |
1,0613 |
1,0669 |
1,0726 |
1,0784 |
1,0812 |
1,0869 |
|
0 |
1,0309 |
1,0366 |
1,0423 |
1,0477 |
1,0535 |
1,0591 |
1,0648 |
1,0705 |
1,0733 |
1,0789 |
|
+2 |
1,0234 |
1,0291 |
1,0347 |
1,0402 |
1,0459 |
1,0514 |
1,0571 |
1,0627 |
1,0655 |
1,0712 |
|
+6 |
1,0087 |
1,0143 |
1,0198 |
1,0253 |
1,0309 |
1,0363 |
1,0419 |
1,0475 |
1,0502 |
1,0557 |
|
+10 |
0,9944 |
0,9999 |
1,0054 |
1,0108 |
1,0162 |
1,0216 |
1,0272 |
1,0326 |
1,0353 |
1,0407 |
|
+14 |
0,9806 |
0,9860 |
0,9914 |
0,9967 |
1,0027 |
1,0074 |
1,0128 |
1,0183 |
1,0209 |
1,0263 |
|
+18 |
0,9671 |
0,9725 |
0,9778 |
0,9880 |
0,9884 |
0,9936 |
0,9989 |
1,0043 |
1,0069 |
1,0122 |
|
+20 |
0,9605 |
0,9658 |
0,9711 |
0,9783 |
0,9816 |
0,9868 |
0,9921 |
0,9974 |
1,0000 |
1,0053 |
|
+22 |
0,9539 |
0,9592 |
0,9645 |
0,9696 |
0,9749 |
0,9800 |
0,9853 |
0,9906 |
0,9932 |
0,9985 |
|
+24 |
0,9475 |
0,9527 |
0,9579 |
0,9631 |
0,9683 |
0,9735 |
0,9787 |
0,9839 |
0,9865 |
0,9917 |
|
+26 |
0,9412 |
0,9464 |
0,9516 |
0,9566 |
0,9618 |
0,9669 |
0,9721 |
0,9773 |
0,9799 |
0,9851 |
|
+28 |
0,9349 |
0,9401 |
0,9453 |
0,9503 |
0,9655 |
0,9605 |
0,9657 |
0,9708 |
0,9734 |
0,9785 |
|
+30 |
0,9288 |
0,9339 |
0,9891 |
0,9440 |
0,9432 |
0,9542 |
0,9594 |
0,9645 |
0,9670 |
0,9723 |
|
+34 |
0,9167 |
0,9218 |
0,9268 |
0,9318 |
0,9368 |
0,9418 |
0,9468 |
0,9519 |
0,9544 |
0,9595 |
|
+38 |
0,9049 |
0,9099 |
0,9149 |
0,9198 |
0,9248 |
0,9297 |
0,9347 |
0,9397 |
0,9421 |
0,9471 |