Государственное
санитарно-эпидемиологическое нормирование
Российской Федерации
УТВЕРЖДЕНО
И. о. Председателя Госкомсанэпиднадзора
России - заместителем Главного
государственного санитарного врача
Российской Федерации
Г.Г. Онищенко
8 июня 1996 г.
МУК 4.1.199-96
Дата введения: с момента утверждения
4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ
Измерение концентраций амида п-гидроксифенилуксусной кислоты методом высокоэффективной жидкостной хроматографии в воздухе рабочей зоны
М. м. 152,25
Амид п-гидроксифенилуксусная кислота (п-гидроксифенил-ацетамид) - кристаллический белый порошок с сероватым оттенком, без запаха, горького вкуса. Тпл. - 170-176 °С. Хорошо растворим в воде и спиртах, менее растворим в ацетоне, хлороформе, четыреххлористом углероде.
В воздухе находится в виде аэрозоля.
Рекомендуемый ОБУВ в воздухе - 3 мг/м3.
Характеристика метода
Методика основана на использовании высокоэффективной жидкостной хроматографии с применением УФ-детектора.
Отбор проб проводят с концентрированием на фильтр.
Нижний предел измерения амида в хроматографируемом объеме - 0,2 мкг.
Нижний предел измерения амида в воздухе - 1,5 мг/м3 (при отборе 15 л воздуха).
Диапазон измеряемых концентраций амида в воздухе 1,5- 30 мг/м3. Измерению не мешают п-гидроксифенилуксусная кислота и другие примеси.
Суммарная погрешность измерения - 19 %.
Время выполнения измерения, включая отбор проб, - 40 мин.
Приборы, аппаратура, посуда
|
Жидкостный хроматограф |
|
|
Милихром-2 |
|
|
Хроматографическая колонка длиной 250 мм с внутренним диаметром 4,6 мм, заполненная сорбентом «Диасорб C8T» с размером зерен 7,5 мкм |
|
|
Весы аналитические типа ВЛА-200 или ВЛР-2 |
ГОСТ 24104-80Е |
|
Аспирационное устройство М-822, МР |
ТУ 42-862-64 |
|
Фильтродержатель |
ТУ 95-72-05-77 |
|
Посуда мерная, лабораторная |
Реактивы, растворы, материалы
|
П-гидроксифенилацетамид, содержание основного вещества - 98 % |
|
|
Метанол, ч. д. а. |
ГОСТ 6995-777 |
|
Фильтры АФА-ВП-10 |
ТУ 85-743-80 |
Стандартный раствор № 1 гидроксифенилацетамида с концентрацией 80 мкг/мл готовят растворением 40 мг амида в 500 мл воды.
Рабочие стандартные растворы с концентрациями 4-80 мкг/мл готовят соответствующим разбавлением стандартного раствора водой (см. табл.). Растворы устойчивы в течение 1 месяца.
Отбор пробы воздуха
Воздух с объемным расходом 1 л/мин аспирируют через фильтр АФА-ВП-10 в течение 15 мин. Для определения 1/2 ОБУВ достаточно отобрать 15 л воздуха. Пробы можно хранить в закрытых сосудах в холодильнике в течение 2 недель.
Подготовка к измерению
Условия хроматографирования градуировочных растворов и анализируемых проб:
|
температура термостата колонок |
+ 45 °С; |
|
скорость потока |
1 мл/мин; |
|
элюэнт: вода - водный метанол (градиент концентраций 0-40 % об. метанола) |
|
|
длина волны УФ-детектора |
275 нм; |
|
скорость движения диаграммной ленты |
6 мм/мин; |
|
диапазон измерения самописца |
100 мВ; |
|
объем вводимой пробы |
50 мкл; |
|
время удерживания пара-гидроксифенилацетамида |
10 мин. |
С использованием стандартных растворов строят калибровочный график, выражающий зависимость высоты пика амида на хроматограмме от массового содержания его в пробе стандартного раствора (см. табл.); проводят пять параллельных измерений для каждой концентрации. Градуировочный график проверяют не реже 1 раза в месяц и каждый раз при смене элюента.
Таблица
Шкала градуировочных растворов
|
№ стандарта |
Стандартный раствор, мл |
Вода, мл |
Содержание амида в растворе, мкг |
Концентрация амида, мкг/мл |
|
1 |
0 |
5,0 |
0 |
0 |
|
2 |
0,25 |
4,75 |
20 |
4 |
|
3 |
0,5 |
4,5 |
40 |
8 |
|
4 |
1,0 |
4,0 |
80 |
16 |
|
5 |
1,5 |
3,5 |
120 |
24 |
|
6 |
2,5 |
2,5 |
200 |
40 |
|
7 |
3,75 |
1,25 |
300 |
60 |
|
8 |
5,0 |
0 |
400 |
80 |
Проведение измерения
Фильтр с отработанной пробой помещают в пробирку с пришлифованной пробкой, добавляют 2,5 мл воды и оставляют на 10 мин, периодически перемешивая. Затем фильтр вынимают из пробирки, помещают во вторую такую же пробирку с 2,5 мл воды и оставляют на 10 мин, периодически перемешивая. Фильтр вынимают из пробирки, дают раствору стечь с фильтра, и растворы из двух пробирок объединяют. Степень десорбции с фильтра - не менее 97 %. Растворы устойчивы в течение 1 месяца.
Хроматографирование объединенного раствора проводят в тех же условиях, что и хроматографирование стандартных растворов. Количественное определение содержания п-гидроксифенилацетамида в анализируемой пробе проводят по предварительно построенному градуировочному графику.
Расчет концентрации
Концентрацию вещества (С) в воздухе (мг/м3) вычисляют по формуле:
, где
а - содержание п-гидроксифенилацетамида в хроматографируемом объеме пробы, найденное по градуировочному графику, мкг;
б - объем пробы, взятой для хроматографирования, мл;
в - общий объем анализируемого раствора, мл;
V - объем воздуха, отобранного для анализа и приведенного к нормальным условиям, л (см. приложение 1).
Методические указания разработаны Российским государственным университетом им. Н. И. Пирогова, г. Москва.
Приложение 1
Приведение объема воздуха к стандартным условиям (температуре 20 °С и давление 760 мм рт. ст.)
Приведение объема воздуха к стандартным условиям проводят по формуле:
, где
Vt - объем воздуха, отобранного для анализа, л;
Р - барометрическое давление, мм рт. ст. (760 мм рт. ст. = 101,33 кПа);
t° - температура воздуха в месте отбора пробы, °С.
Для удобства расчета Vст следует пользоваться таблицей коэффициентов (приложение 2). Для приведения объема воздуха к температуре 20 °С и давлению 760 мм рт. ст. (101,33 кПа) надо умножить Vt на соответствующий коэффициент.
Приложение 2
Коэффициент К для приведения объема воздуха к стандартным условиям
|
Давление Р, кПа/мм рт. ст. |
||||||||||
|
°С |
730 |
734 |
738 |
742 |
746 |
750 |
754 |
758 |
760 |
764 |
|
-30 |
1,1582 |
1,1646 |
1,1709 |
1,1772 |
1,1836 |
1,1899 |
1,1963 |
1,2026 |
1,2058 |
1,2122 |
|
-26 |
1,1393 |
1,1456 |
1,1519 |
1,1581 |
1,1644 |
1,1705 |
1,1768 |
1,1831 |
1,1862 |
1,1925 |
|
-22 |
1,1212 |
1,1274 |
1,1336 |
1,1396 |
1,1458 |
1,1519 |
1,1581 |
1,1643 |
1,1673 |
1,1735 |
|
-18 |
1,1036 |
1,1097 |
1,1158 |
1,1218 |
1,1278 |
1,1338 |
1,1399 |
1,1400 |
1,1490 |
1,1551 |
|
-14 |
1,0866 |
1,0926 |
1,0986 |
1,1045 |
1,1105 |
1,1164 |
1,1224 |
1,1284 |
1,1313 |
1,1373 |
|
-10 |
1,0701 |
1,0760 |
1,0819 |
1,0877 |
1,0986 |
1,0994 |
1,1053 |
1,1112 |
1,1141 |
1,1200 |
|
-6 |
1,0540 |
1,0599 |
1,0657 |
1,0714 |
1,0772 |
1,0829 |
1,0887 |
1,0945 |
1,0974 |
1,1032 |
|
-2 |
1,0385 |
1,0442 |
1,0499 |
1,0556 |
1,0613 |
1,0669 |
1,0726 |
1,0784 |
1,0812 |
1,0869 |
|
0 |
1,0309 |
1,0366 |
1,0423 |
1,0477 |
1,0535 |
1,0591 |
1,0648 |
1,0705 |
1,0733 |
1,0789 |
|
+2 |
1,0234 |
1,0291 |
1,0347 |
1,0402 |
1,0459 |
1,0514 |
1,0571 |
1,0627 |
1,0655 |
1,0712 |
|
+6 |
1,0087 |
1,0143 |
1,0198 |
1,0253 |
1,0309 |
1,0363 |
1,0419 |
1,0475 |
1,0502 |
1,0557 |
|
+10 |
0,9944 |
0,9999 |
1,0054 |
1,0108 |
1,0162 |
1,0216 |
1,0272 |
1,0326 |
1,0353 |
1,0407 |
|
+14 |
0,9806 |
0,9860 |
0,9914 |
0,9967 |
1,0027 |
1,0074 |
1,0128 |
1,0183 |
1,0209 |
1,0263 |
|
+18 |
0,9671 |
0,9725 |
0,9778 |
0,9880 |
0,9884 |
0,9936 |
0,9989 |
1,0043 |
1,0069 |
1,0122 |
|
+20 |
0,9605 |
0,9658 |
0,9711 |
0,9783 |
0,9816 |
0,9868 |
0,9921 |
0,9974 |
1,0000 |
1,0053 |
|
+22 |
0,9539 |
0,9592 |
0,9645 |
0,9696 |
0,9749 |
0,9800 |
0,9853 |
0,9906 |
0,9932 |
0,9985 |
|
+24 |
0,9475 |
0,9527 |
0,9579 |
0,9631 |
0,9683 |
0,9735 |
0,9787 |
0,9839 |
0,9865 |
0,9917 |
|
+26 |
0,9412 |
0,9464 |
0,9516 |
0,9566 |
0,9618 |
0,9669 |
0,9721 |
0,9773 |
0,9799 |
0,9851 |
|
+28 |
0,9349 |
0,9401 |
0,9453 |
0,9503 |
0,9655 |
0,9605 |
0,9657 |
0,9708 |
0,9734 |
0,9785 |
|
+30 |
0,9288 |
0,9339 |
0,9891 |
0,9440 |
0,9432 |
0,9542 |
0,9594 |
0,9645 |
0,9670 |
0,9723 |
|
+34 |
0,9167 |
0,9218 |
0,9268 |
0,9318 |
0,9368 |
0,9418 |
0,9468 |
0,9519 |
0,9544 |
0,9595 |
|
+38 |
0,9049 |
0,9099 |
0,9149 |
0,9198 |
0,9248 |
0,9297 |
0,9347 |
0,9397 |
0,9421 |
0,9471 |