ГОСТ ISO 15914-2016

     
     
МЕЖГОСУДАРСТВЕННЫЙ СТАНДАРТ

КОРМА ДЛЯ ЖИВОТНЫХ

Ферментативный метод определения содержания общего крахмала

Animal feeding stuffs. Enzymatic determination of total starch content

МКС 65.120

Дата введения 2017-07-01

     
     

Предисловие

Цели, основные принципы и общие правила проведения работ по межгосударственной стандартизации установлены ГОСТ 1.0 "Межгосударственная система стандартизации. Основные положения" и ГОСТ 1.2 "Межгосударственная система стандартизации. Стандарты межгосударственные, правила и рекомендации по межгосударственной стандартизации. Правила разработки, принятия, обновления и отмены"

Сведения о стандарте

1 ПОДГОТОВЛЕН Федеральным государственным бюджетным научным учреждением "Всероссийский научно-исследовательский институт кормов имени В.Р.Вильямса (ФГБНУ "ВНИИ кормов им.В.Р.Вильямса") на основе собственного перевода на русский язык англоязычной версии стандарта, указанного в пункте 5

2 ВНЕСЕН Федеральным агентством по техническому регулированию и метрологии

3 ПРИНЯТ Межгосударственным советом по стандартизации, метрологии и сертификации (протокол от 25 мая 2016 г. N 88-П)

За принятие проголосовали:

4 Приказом Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии от 29 сентября 2016 г. N 1253-ст межгосударственный стандарт ГОСТ ISO 15914-2016 введен в действие в качестве национального стандарта Российской Федерации с 1 июля 2017 г.

5 Настоящий стандарт идентичен международному стандарту ISO 15914:2004* "Корма для животных. Ферментативный метод определения содержания общего крахмала" ("Animal feeding stuffs - Enzymatic determination of total starch content", IDT).

________________

* Доступ к международным и зарубежным документам, упомянутым в тексте, можно получить, обратившись в Службу поддержки пользователей. - Примечание изготовителя базы данных.

           

Международный стандарт разработан Техническим комитетом по стандартизации ISO/TC 34 "Пищевые продукты", Подкомитетом SC 10 "Корма для животных" Международной организации по стандартизации (ISO).

При применении настоящего стандарта рекомендуется использовать вместо ссылочных международных стандартов соответствующие им межгосударственные стандарты, сведения о которых приведены в дополнительном приложении ДА

6 ВВЕДЕН ВПЕРВЫЕ          

7 ПЕРЕИЗДАНИЕ. Май 2020 г.

Информация о введении в действие (прекращении действия) настоящего стандарта и изменений к нему на территории указанных выше государств публикуется в указателях национальных стандартов, издаваемых в этих государствах, а также в сети Интернет на сайтах соответствующих национальных органов по стандартизации.

В случае пересмотра, изменения или отмены настоящего стандарта соответствующая информация будет опубликована на официальном интернет-сайте Межгосударственного совета по стандартизации, метрологии и сертификации в каталоге "Межгосударственные стандарты"

     1 Область применения

Настоящий стандарт устанавливает ферментативный метод определения содержания общего крахмала в кормах для животных и в сырье для их производства.

Метод также применим для установления наличия примесей в крахмале.

В анализируемой пробе не должно содержаться компонентов, которые обладают абсорбцией при длине волны 340 нм.

Аналитический диапазон метода определения общего крахмала в анализируемой пробе от 40 до 1000 г/кг. Диапазоны содержания от 200 до 1000 г/кг и от 40 до 200 г/кг крахмала определяются по различным стандартным растворам глюкозы. В случае содержания крахмала в анализируемой пробе в диапазоне от 40 г/кг до 200 г/кг применяется другая процедура разбавления стандартного раствора глюкозы и проб.

     2 Нормативные ссылки           

В настоящем стандарте использованы нормативные ссылки на следующие стандарты. Для датированных ссылок применяют только указанное издание ссылочного стандарта, для недатированных - последнее издание (включая все изменения).

ISO 3696:1987, Water for analytical laboratory use - Specification and test methods (Вода для лабораторного анализа. Технические требования и методы испытаний)

ISO 6498:1998, Animal feeding stuffs - Preparation of test samples (Корма для животных. Приготовление проб для испытания)

_______________

Заменен на ISO 6498:2012.

     3 Термины и определения

В настоящем стандарте применяют следующие термины с соответствующими определениями:

3.1 крахмал (starch): Натуральный растительный полимер, состоящий из длинных неразветвленных цепей 1,4--D-глюкозных единиц (амилоза) и/или длинных -1,6-разветвленных цепей -1,4-связанных глюкозных единиц (амилопектин).

3.2 содержание крахмала (starch content): Массовая доля крахмала и высокомолекулярных продуктов его распада, нерастворимых в 40%-ном этаноле, определенная в соответствии с методом, установленным в настоящем стандарте.

Примечание - Содержание крахмала выражается в граммах на килограмм.

     4 Сущность метода

Размолотую анализируемую пробу экстрагируют 40%-ным этанолом для удаления растворимых сахаров. После удаления сахаров остаток анализируемой пробы для экстракции и растворения в ней крахмала обрабатывают водным раствором диметилсульфоксида (ДМСО) (объемная доля 90%) при температуре 100°C, затем концентрированной соляной кислотой при температуре 60°C.

Растворенный и разжиженный крахмал количественно превращается в глюкозу с помощью фермента амилоглюкозидазы. Количество образовавшейся глюкозы определяют гексокиназным методом [1], [2].

     5 Реактивы

Используют реактивы установленной аналитической чистоты.

5.1 Вода чистотой не менее 3-й степени по ISO 3696.

5.2 Этанол (CHOH) объемной долей 40%

Этанол объемом 417 см (объемная доля 96%) разбавляют водой до 1000 см.

5.3 Соляная кислота, c(HCl)=12 моль/дм.

5.4 Водный раствор гидроксида натрия, c(NaOH)=4 моль/дм

В химическом стакане растворяют 40 г гидроксида натрия в 50 см воды. После охлаждения раствор переносят в мерную колбу вместимостью 250 см и его объем доводят до метки водой.

ПРЕДУПРЕЖДЕНИЕ - Выделяется тепло. Необходимо проводить растворение в защитных очках.

5.5 Раствор уксусной кислоты, c(CHCOOH)=2 моль/дм

В мерную колбу вместимостью 500 см вносят 200 см воды, затем 59 см ледяной уксусной кислоты. Доводят объем раствора в колбе до метки водой.

5.6 Раствор уксуснокислого натрия, c(CHCOONa)=2 моль/дм

В мерной колбе вместимостью 500 см растворяют в воде 82,0 г уксуснокислого натрия и разбавляют раствор до метки водой.

5.7 Буфер уксуснокислого натрия, c(CHCOONa/H)=2 моль/дм, pH=4,8 ед. pH

Смешивают 41 см раствора уксусной кислоты (5.5) 59 см раствора уксуснокислого натрия (5.6). Проверяют значение pH на pH-метре и, при необходимости, устанавливают требующееся значение pH, пользуясь раствором уксусной кислоты или уксуснокислого натрия.

Ежедневно готовят свежий буферный раствор.

5.8 Диметилсульфоксид (ДМСО), объемной долей 90%

Смешивают ДМСО и воду в объемном соотношении 9:1.

5.9 Осветляющие растворы по Каррезу

5.9.1 Раствор железистосинеродистого калия (II), c[KFe(CN)]=0,25 моль/дм.

В мерной колбе вместимостью 1 дм растворяют в воде 106 г трехводного железистосинеродистого калия (II) [KFe(CN)·3HO]. Доводят объем раствора до метки водой.

5.9.2 Раствор уксуснокислого цинка в 0,5 моль/дм уксусной кислоты, c[Zn(CHCO)]=1 моль/дм.

В мерной колбе вместимостью 1 дм растворяют в воде 219,5 г двуводного уксуснокислого цинка [] и 30 г ледяной уксусной кислоты. Доводят объем раствора до метки водой.

5.10 Раствор йода в йодистом калии

В мерной колбе вместимостью 1 дм растворяют в воде 12,7 г йода (I) и 24,0 г йодистого калия (KI). Доводят объем раствора водой до метки. Перед использованием полученный раствор разбавляют в 10 раз.

5.11 Стандартный раствор глюкозы

5.11.1 Стандартные растворы глюкозы, используемые при анализе проб, содержащих крахмал в пределах 200-1000 г/кг

Готовят три стандартных раствора глюкозы c[CHO]=0,0194 моль/дм. В каждой мерной колбе вместимостью 100 см растворяют в воде (350±1) мг безводной глюкозы, взвешенной с точностью 1 мг. Доводят объем раствора до метки водой.

5.11.2 Стандартные растворы глюкозы, используемые при анализе проб, содержащих крахмал в пределах 40-200 г/кг

Готовят три стандартных раствора глюкозы c[CHO]=0,0039 моль/дм. В каждой мерной колбе вместимостью 500 см растворяют в воде (350±1) мг безводной глюкозы. Доводят объем раствора до метки водой.

Ежедневно готовят свежие стандартные растворы глюкозы.

5.12 Раствор амилоглюкозидазы (АМГ), 160 единиц/см

Амилоглюкозидазу (АМГ) массой 267 мг [EC 3.2.1.3 (Aspergillus niger, Roche Diagnostics, No 1202367, 6 U/mg)] растворяют в смеси 9 см воды и 1 см буфера уксуснокислого натрия (5.7). При хранении и использовании фермента необходимо тщательно соблюдать рекомендации производителя.

_______________

Roche Diagnostics No. 1202367 является примером имеющегося в продаже подходящего продукта. Эта информация предоставляется для удобства пользователей настоящего стандарта.

Если используется другой фермент, следует учитывать его активность, как указано в примечании. В этом случае необходимую массу фермента, достаточную для разложения крахмала, определяют в соответствии с его активностью.

Примечание - Различные поставщики фермента используют различные обозначения единиц активности фермента. В настоящем стандарте использовано следующее обозначение единицы активности фермента АМГ - 1 единица амилоглюкозидазы, способная выделять 1 мкмоль глюкозы из гликогена за 1 мин при 25°C и pH=4,75 ед. 10 см раствора фермента достаточно для 75 определений.

5.13 Набор реактивов для определения концентрации D-глюкозы ферментативным гексокиназным УФ-методом (R-Biopharm, No. 716251). Согласно инструкции производителя неиспользованные наборы можно хранить в течение года при температуре 4°C. Реактивы, включенные в набор и их приготовление при проведении анализов - по 5.13.1 и 5.13.2.

________________

R-Biopharm AG No. 716251 является примером имеющегося в продаже подходящего продукта. Эта информация предоставляется для удобства пользователей настоящего стандарта.

5.13.1 Раствор буфер/субстрат (склянка 1)

Содержимое склянки 1 растворяют в 45 см воды. Реактив хранят при температуре 4°C в темном месте в течение не более четырех недель и используют при комнатной температуре.

5.13.2 Раствор фермента (склянка 2)

Раствор готов для использования.

5.13.3 Окрашивающий раствор

Смешивают 22,5 см раствора буфер/субстрат (5.13.1) с 95 см воды и 0,45 см раствора фермента (5.13.2) и гомогенизируют. Полученное количество раствора достаточно для проведения приблизительно 40 измерений. Используют только свежеприготовленные окрашивающие растворы при комнатной температуре.

           

     6 Оборудование, посуда и вспомогательные материалы

6.1 Аналитические весы с точностью взвешивания 0,1 мг.

6.2 Центрифуга с ускорением (180±10) g и 3000 g, подходящая для пробирок с завинчивающимися крышками вместимостью 12 см (значение g дается на дне пробирки).

6.3 Водяная баня, поддерживающая температуру (100±2)°C.

6.4 Водяная баня, поддерживающая температуру (60±1)°C.

6.5 pH-метр градуированный с комбинированным стеклянным электродом точностью измерения 0,01 ед. pH.

6.6 Микропипетки градуированные с регулируемым объемом раствора: 40-200 мкдм, 200-1000 мкдм, 1-5 см и дозатор с регулируемым объемом раствора 1-5 см.

6.7 Спектрометр с проточной кюветой, позволяющий проводить измерения при длине волны 340 нм.

6.8 Ротационный шейкер с частотой вращения 50 об/мин для центрифужных пробирок с завинчивающимися крышками (6.11).

6.9 Дозатор/разбавитель Hook&Tucker Compudil D.

________________

Hook&Tucker Compudil D является примером имеющегося в продаже подходящего продукта. Эта информация предоставляется для удобства пользователей настоящего стандарта.

6.10 Сушильный шкаф с принудительной вентиляцией воздуха.

6.11 Стеклянные центрифужные пробирки, 10016 мм, с завинчивающимися крышками, подходящими к резиновым пробкам, покрытым фторопластом.

6.12 Мерные колбы вместимостью 100 см широкогорлые, снабженные притертым стеклянным соединением 14/23, позволяющие измерять значение pH раствора в колбе комбинированным стеклянным электродом.

6.13 Мешалка для пробирок (Vortex mixer) для альтернативного метода разложения и растворения крахмала по 8.4.2.

________________

Vortex mixer является примером имеющегося в продаже подходящего продукта. Эта информация предоставляется для удобства пользователей настоящего стандарта.

6.14 Шейкерная водяная баня, поддерживающая температуру (100±2)°C, с длиной хода 2 см, частотой колебаний 150-200 раз в минуту. Водяная баня должна быть снабжена штативом, чтобы пробирки размещались в воде в горизонтальном положении.

6.15 Стеклянные центрифужные пробирки вместимостью не менее 20 см с завинчивающимися насадками, подходящими к резиновым пробкам, покрытым фторопластом.

6.16 Стеклянные шарики диаметром 3 мм.

     7 Приготовление анализируемой пробы

Анализируемую пробу готовят в соответствии с ISO 6498.

     8 Проведение анализа

8.1 Анализируемая проба

Анализы выполняют в двукратной повторности.

Взвешивают около 200 мг анализируемой пробы (раздел 7) в центрифужной пробирке (6.11). Во второй центрифужной пробирке взвешивают вторые 200 мг как дубликат подготовленной пробы (раздел 7).

Анализируют пробы в каждой пробирке.

8.2 Экстракция сахаров

В каждую пробирку добавляют 10 см этанола (5.2). Экстрагируют растворимые сахара путем непрерывного встряхивания суспензии в течение 10 мин на ротационном шейкере (6.8). Затем центрифугируют в течение 10 мин на центрифуге (6.2) с радиальным ускорением (180±10)g и удаляют надосадочную жидкость. Экстракцию проводят дважды.

8.3 Холостая проба

Начиная с этой стадии в каждой серии анализов выполняют холостое определение, которое включает все стадии анализа, кроме взятия навески анализируемой пробы в пробирку.

8.4 Разложение крахмала

8.4.1 Общее

Разложение и растворение крахмала можно выполнить двумя способами (8.4.2 - способ 1 или 8.4.3 - способ 2). При проведении анализа по 8.4.3 анализируемую пробу помещают в стеклянную центрифужную пробирку с завинчивающейся крышкой вместимостью не менее 20 см (6.15).

8.4.2 Проведение анализа 1

В пробирку с анализируемой пробой при непрерывном перемешивании на мешалке для пробирок (6.13) дозатором добавляют 10 см ДМСО (5.8) и продолжают перемешивать до получения свободной от комочков суспензии. Пробирку закрывают завинчивающейся крышкой.

Примечание - Энергичная гомогенизация при добавлении ДМСО необходима для предотвращения образования микрогеля и/или комочков. Образование микрогеля и комочков приводит к получению ошибочного результата анализа, главным образом, заниженного, в связи с неполным гидролизом крахмала ферментом АМГ.

После гомогенизации пробирку немедленно вставляют в ротационный шейкер (6.8) и помещают на 30 мин в сушильный шкаф при температуре 100°C для расщепления крахмала. Пробирку охлаждают, после чего пипеткой (6.6) добавляют 1,7 см концентрированной соляной кислоты (5.3), тщательно перемешивают. Пробирку закрывают и помещают в ротационный шейкер. Для частичного гидролиза пробы пробирку ставят в сушильный шкаф (6.10) при непрерывном встряхивании в течение 30 мин при температуре 60°C.

Далее анализ выполняют по 8.4.4.

8.4.3 Проведение анализа 2

В остаток в стеклянной центрифужной пробирке (6.15) помещают 15 стеклянных шариков (6.16). В пробирку с помощью раздаточного устройства/разбавителя, при непрерывном перемешивании на мешалке (6.13), добавляют 10,0 см водного ДМСО до получения суспензии без комочков. Пробирку закрывают завинчивающейся крышкой.

Примечание - Энергичная гомогенизация при добавлении ДМСО необходима для предотвращения образования микрогеля и/или комочков. Микрогель и комочки приводят к ошибочному результату определения содержания крахмала.

Пробирку помещают в штативе в горизонтальном положении в кипящую водяную баню (6.14) и встряхивают в течение 30 мин. После охлаждения в нее пипеткой (6.6) добавляют 1,7 см концентрированной соляной кислоты (5.3) и тщательно перемешивают. Пробирку закрывают и помещают в водяную баню при температуре (60±1)°C, встряхивают в течение 30 мин. При этом происходит частичный гидролиз крахмала. Далее анализ выполняют по 8.4.4.

8.4.4 Регулирование значения pH

 Пробирку охлаждают и ее содержимое переносят в мерную колбу вместимостью 100 см (6.12). Добавляют 5 см водного раствора гидроксида натрия (5.4) и 2,5 см буфера уксуснокислого натрия (5.7), раствор гомогенизируют. Измеряют значение pH раствора на pH-метре (6.5). При необходимости значение pH устанавливают до (4,8±0,1) ед. pH разбавленной соляной кислотой или гидроокисью натрия. Смывают раствор и приставшие с ним частички пробы с электродов pH-метра водой в ту же мерную колбу и доводят объем раствора до метки водой.

8.5 Ферментативное разложение крахмала в глюкозу

Сразу после гомогенизации пипеткой (6.6) переносят 5,00 см (этот объем в формуле расчета содержания крахмала по 9.2 соответствует объему, обозначенному как ) гомогенизированного раствора расщепленного и частично разложенного крахмала (8.4.4) в чистую и сухую стеклянную пробирку (6.11). Пипеткой (6.6) добавляют 0,125 см раствора фермента АМГ (5.12). Закрывают пробирку завинчивающейся крышкой и тщательно гомогенизируют. Раствор инкубируют в водяной бане при температуре 60°C в течение времени не менее 16 ч. Для инактивации АМГ пробирку помещают в кипящую водяную баню на 15 мин. Пробирку охлаждают до комнатной температуры и добавляют пипеткой 0,125 см раствора железистосинеродистого калия (5.9.1) и встряхивают в течение 1 мин. Добавляют пипеткой 0,125 см раствора уксуснокислого цинка (5.9.2) и снова встряхивают в течение 1 мин. В пробирке содержится 5,375 см раствора (который равен при расчетах в 9.2). Затем центрифугируют в течение 10 мин с радиальным ускорением не менее 3000 g. Надосадочную жидкость переносят в чистую и сухую пробирку.

Для проверки полноты гидролиза крахмала в центрифужную пробирку добавляют несколько см воды, кипятят в течение 10 мин, охлаждают и вносят 0,2 см раствора йода. Голубая окраска показывает наличие крахмала, что означает его неполное разложение. В случае наличия крахмала анализ данной пробы повторяют (см. 8.1).

8.6 Ферментативное определение содержания глюкозы

8.6.1 Пробы с содержанием крахмала 200-1000 г/кг

В отдельные чистые сухие пробирки помещают по 0,5 см каждого из растворов гидролизованного крахмала (8.5), холостой пробы (8.3), три стандартных раствора глюкозы (5.11.1) и воду (5.1). В пробирки с помощью дозатора/разбавителя (6.9) приливают по 9,5 см воды (5.1) и гомогенизируют.

8.6.2 Пробы с содержанием крахмала 40-200 г/кг

Отбирают пипеткой по 0,5 см растворов гидролизованного крахмала (8.5), холостой пробы (8.3), трех стандартных растворов глюкозы (5.11.2) и воды (5.1) в отдельную чистую сухую пробирку. Отобранные растворы разбавляют при помощи дозатора/разбавителя (6.9) с 1,5 см воды (5.1) и гомогенизируют.

Если ожидается низкое содержание крахмала (менее 200 г/кг), для повышения чувствительности определения используют другое соотношение разбавления для ферментативного гидролиза крахмала в глюкозу. Такое же разбавление необходимо соблюдать и для холостой пробы.

Готовят стандартные растворы глюкозы сравнительно более низкой концентрации и разбавляют стандартные растворы также, как и растворы анализируемой и холостой проб.

Колориметрические измерения холостой пробы (8.3), воды (5.1) и трех стандартных растворов глюкозы проводят дважды. Анализируемые пробы, содержащие гидролизованный крахмал, измеряют один раз.

Пипеткой (6.6) переносят по 0,4 см разбавленных растворов анализируемой пробы, холостой пробы, разбавленных стандартных растворов глюкозы и воды в чистые сухие центрифужные пробирки. В пробирки пипеткой (6.6) добавляют 2,62 см окрашивающего раствора (5.13.3) и тщательно перемешивают. Измеряют абсорбцию (см. 6.7) раствора при длине волны 340 нм относительно воды.

     9 Обработка и выражение результатов

Вычисляют значение абсорбции для каждого их трех стандартных растворов глюкозы (E), для чего из значения абсорбции стандартного раствора глюкозы, полученного на приборе (E) вычитают значение абсорбции окрашенной воды (E), по формуле

.                                                        (1)

Значение абсорбции неокрашенной воды (по определению) равно нулю.

Используя линейный регрессионный анализ, строят градуировочный график для значений абсорбции против содержания глюкозы в неразбавленных стандартных растворах глюкозы (в г/дм).

Вычисляют значение абсорбции раствора анализируемой пробы (E), для чего из значения абсорбции раствора пробы, полученного на приборе (E), вычитают значение абсорбции раствора холостой пробы (E) по формуле

.                                                        (2)

Используя градуировочный график, (9.1), вычисляют содержание глюкозы () в неразбавленных растворах пробы (8.5), г/дм.

Смотреть приложение A.

9.2 Вычисление содержания крахмала

Содержание крахмала в анализируемой пробе , г/кг, вычисляют по формуле

,                                                     (3)

где - содержание глюкозы в растворе пробы, вычисленное в соответствии с 9.1, г/дм;

V - объем раствора крахмала в 8.5, взятого для гидролиза (5,00 см);

V - общий объем раствора после ферментативного гидролиза крахмала в глюкозу в 8.5, равный 5,375 см;

m - масса анализируемой пробы, г.

Для вычисления содержания крахмала по вышеприведенной формуле необходимо, чтобы были использованы соответствующие разбавления растворов пробы в 8.6.1 и стандартных растворов глюкозы в 5.11.     

     10 Прецизионность

10.1 Межлабораторные испытания

Подробности межлабораторных испытаний по определению прецизионности метода приводятся в приложении B. Значения, полученные в межлабораторных испытаниях, не применимы для других диапазонов концентрации и матриц, отличающихся от приведенных.

10.2 Повторяемость

Абсолютная разница между двумя независимыми единичными результатами испытания, полученными с использованием одного и того же метода, на идентичном анализируемом материале в одной и той же лаборатории одним и тем же оператором на одном и том же оборудовании в течение короткого интервала времени, не должна превышать более чем в 5% случаев предел повторяемости:

- 14 г/кг для гороха, комбикорма молочного скота и тапиоки;

- 17 г/кг для корма поросят;

- 48 г/кг для корма кур-несушек (см. приложение B).

10.3 Воспроизводимость

Абсолютная разница между двумя независимыми единичными результатами испытания, полученными с использованием одного и того же метода на идентичном анализируемом материале в разных лабораториях различными операторами на различном оборудовании в течение короткого интервала времени, не должна превышать более чем в 5% случаев предел воспроизводимости:

- 25 г/кг для корма поросят;

- 34 г/кг для тапиоки;

- 36 г/кг для комбикорма молочного скота;

- 48 г/кг для корма кур-несушек;

- 50 г/кг для гороха (см. приложение B).

     11 Протокол испытаний

Протокол испытаний должен включать:

- всю информацию, необходимую для полной идентификации пробы;

- использованный метод отбора проб, если он известен;

- использованный метод анализа со ссылкой на настоящий стандарт;

- все подробности анализа, не установленные в настоящем стандарте или рассматриваемые как необязательные, вместе с подробностями любых случайностей, которые могли оказать влияние на результат(ы) анализа;

- полученный результат анализа или два результата анализа, если контролировалась повторяемость.

Приложение A
(справочное)

     
Отдельные примечания к ходу проведения анализа

A.1 Градуировочная кривая, построенная по результатам трехкратного измерения холостого и стандартного растворов, более достоверна, чем кривая, построенная на результатах однократного измерения холостого и пяти градуировочных растворов различных концентраций [5].

A.2 Для получения точных результатов анализируемая проба не должна содержать компонентов, которые обладают абсорбцией или абсорбцией в условиях проведения анализа при длине волны 340 нм. Поэтому при анализе неизвестных проб следует контролировать отсутствие в них таких компонентов следующим способом.

По 0,4 см подготовленных по 8.6.1 растворов анализируемой пробы и холостой пробы пипеткой переносят в стеклянные пробирки. В пробирки прибавляют 2,6 см окрашивающего раствора, приготовленного без добавления раствора фермента.

Через 30-60 мин измеряют абсорбцию растворов при длине волны 340 нм. Разница в абсорбции между растворами анализируемой и холостой проб не должна превышать 0,002 единицы абсорбции. Для анализа проб, у которых эта разница выше, метод не применим. Пробы, исследованные при разработке настоящего стандарта, - пробы кормов для животных, зерен злаков (кукурузы, пшеницы), лебеды и лиофильно-высушенной картофельной мезги - удовлетворяли этому условию.

Приложение B
(справочное)

     
Результаты межлабораторных испытаний

Межлабораторные испытания проводились в 1998 г. в соответствии с [4]. Участвовало двенадцать лабораторий. Изучались пробы обезвоженной тапиоки, корма для кур-несушек, зерна гороха, корма для поросят и комбикорма для молочного скота. Показатели прецизионности приводятся в таблице B.1.

Таблица B.1 - Статические* результаты межлабораторного исследования
________________

* Текст документа соответствует оригиналу. - Примечание изготовителя базы данных.

Приложение ДА
(справочное)

     
Сведения о соответствии ссылочных международных стандартов межгосударственным стандартам

Таблица ДА.1

_______________     

Действует ГОСТ ISO 6498-2014 "Корма, комбикорма. Подготовка проб для испытаний", идентичный ISO 6498:2012.          

      
     

Библиография