Федеральная служба по гидрометеорологии и мониторингу
окружающей среды (Росгидромет)

МАССОВАЯ КОНЦЕНТРАЦИЯ ХЛОРИДАЗОНА В ВОДАХ
Методика измерений газохроматографическим методом

Ростов-на-Дону

2012

Предисловие

1 РАЗРАБОТАН федеральным государственным бюджетным учреждением «Гидрохимический институт» (ФГБУ «ГХИ»)

2 РАЗРАБОТЧИКИ Л.В. Боева, канд. хим. наук

3 СОГЛАСОВАН с ФГБУ «НПО «Тайфун» 09.02.2012

и УМЗА Росгидромета 02.04.2012

4 УТВЕРЖДЕН Заместителем Руководителя Росгидромета 03.04.2012

5 АТТЕСТОВАН ФГБУ «ГХИ», свидетельство об аттестации методики измерений № 472.01.00175-2011 от 30.09.2011

6 ЗАРЕГИСТРИРОВАН ЦМТР ФГБУ «НПО «Тайфун» за номером РД 52.24.472-2012 от 20.04.2012

7 ВЗАМЕН РД 52.24.472-95 «Методические указания. Методика выполнения измерений массовой концентрации хлоридазона в поверхностных водах суши газохроматографическим методом»

СОДЕРЖАНИЕ

Введение

Гербицид хлоридазон (пиразол, пирамин, феназон) широко применяется в агрохимической практике для борьбы с сорными растениями, что обусловливает поступление этого гербицида в водные объекты с ливневым стоком с сельхозугодий и через атмосферу.

Химическое наименование хлоридазона - 5-амино-4-хлор-2-фенил-пиридазин-3(2Н)-он, структурная формула

Из-за значительных объемов применения хлоридазон включен в приоритетный перечень пестицидов, подлежащих контролю в поверхностных водных объектах.

Предельно допустимая концентрация (ПДК) хлоридазона в природных водах составляет 0,01 мг/дм (10 мкг/дм³).

МАССОВАЯ КОНЦЕНТРАЦИЯ ХЛОРИДАЗОНА В ВОДАХ

Методика измерений газохроматографическим методом

1 Область применения

1.1 Настоящий руководящий документ устанавливает методику измерений (далее - методика) массовой концентрации хлоридазона в пробах природных и очищенных сточных вод в диапазоне от 10 до 300 мкг/дм³ газохроматографическим методом.

1.2 Допускается выполнение измерений в пробах с массовой концентрацией хлоридазона, превышающей верхний предел указанного в 1.1 диапазона, при разбавлении экстракта в соответствии с 10.6.

1.3 Настоящий руководящий документ предназначен для применения в лабораториях, осуществляющих анализ природных и очищенных сточных вод.

2 Нормативные ссылки

В настоящем руководящем документе использованы ссылки на следующие нормативные документы:

ГОСТ 12.1.005-88 ССБТ. Общие санитарно-гигиенические требования к воздуху рабочей зоны

ГОСТ 12.1.007-76 ССБТ. Вредные вещества. Классификация и общие требования безопасности

ГОСТ 17.1.5.04-81 Охрана природы. Гидросфера. Приборы и устройства для отбора, первичной обработки и хранения проб природных вод. Общие технические условия

ГОСТ 17.1.5.05-85 Охрана природы. Гидросфера. Общие требования к отбору проб поверхностных и морских вод, льда и атмосферных осадков

ГОСТ Р ИСО 5725-6-2002 Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 6. Использование значений точности на практике

ГОСТ Р 51592-2000 Вода. Общие требования к отбору проб

МИ 2881-2004 Рекомендация. ГСИ. Методики количественного химического анализа. Процедуры проверки приемлемости результатов анализа

Примечание - Ссылки на остальные нормативные документы приведены в разделе 4.

3 Требования к показателям точности измерений

3.1 При соблюдении всех регламентируемых методикой условий проведения измерений характеристики погрешности результата измерения с вероятностью 0,95 не должны превышать значений, приведенных в таблице 1.

Таблица 1 - Диапазон измерений, значения характеристик погрешности и ее составляющих при принятой вероятности Р = 0,95

При выполнении измерений массовой концентрации хлоридазона свыше 300 мкг/дм³ при соответствующем разбавлении экстракта, погрешность измерения не превышает значений, рассчитанных по приведенной в таблице 1 зависимости. Предел обнаружения хлоридазона составляет 3 мкг/дм³.

3.2 Значения показателя точности методики используют при:

- оформлении результатов измерений, выдаваемых лабораторией;

- оценке деятельности лабораторий на качество проведения измерений;

- оценке возможности использования результатов измерений при реализации методики в конкретной лаборатории.

4 Требования к средствам измерений, вспомогательным устройствам, реактивам, материалам

4.1 Средства измерений, вспомогательные устройства

4.1.1 Хроматограф газовый Кристалл 2000 М, Хроматэк-Кристалл 5000.2, Цвет-550, Цвет-800 или другой с термоионным или термоаэрозольным детектором.

4.1.2 Весы высокого (II) класса точности по ГОСТ Р 53228-2008, максимальная нагрузка не более 200 г., дискретность отсчета не более 0,0002 г.

4.1.3 Весы среднего (III) класса точности по ГОСТ 53228-2008, максимальная нагрузка не более 1500 г, дискретность отсчета 0,01 г.

4.1.4 Термометр любого типа по ГОСТ 29224-91 с диапазоном измерения от 0 °С до 100 °С и ценой деления 1 °С.

4.1.5 Микрошприцы МШ-10М по ТУ 2-833-106-90-2 шт..

4.1.6 Государственный стандартный образец состава пестицида хлоридазона ГСО 7666-99 (далее - ГСО), массовая доля основного вещества не менее 99 %.

4.1.7 Колбы мерные 2-го класса точности исполнения 2 по ГОСТ 1770-74 вместимостью: 25 см³ - 1 шт., 50 см³ - 1 шт.

4.1.8 Колбы мерные 2-го класса точности исполнения 2 или пробирки градуированные исполнения 2 с ценой деления 0,1 см³ по ГОСТ 1770-74 с притертыми стеклянными пробками вместимостью 10 см³ - 5 шт.

4.1.9 Пробирки градуированные исполнения 2 с ценой деления 0,1 см³ по ГОСТ 1770-74 с притертыми стеклянными пробками вместимостью 5 см³ - 5 шт.

4.1.10 Пипетки градуированные 2-го класса точности исполнения 1 по ГОСТ 29227-91 вместимостью: 1 см³ - 3 шт., 2 см³ - 3 шт.

4.1.11 Пипетка с одной отметкой 2-го класса точности исполнения 2 по ГОСТ 29169-91 вместимостью 5 см³ - 1 шт.

4.1.12 Цилиндры мерные исполнения 1, 3 по ГОСТ 1770-74 вместимостью: 25 см³ - 2 шт., 50 см³ - 2 шт., 500 см³ - 2 шт.

4.1.13 Колбы Кн исполнения 1, ТС, по ГОСТ 25336-82 с притертыми стеклянными пробками вместимостью 100 см³ - 10 шт.

4.1.14 Воронки делительные типа ВД исполнения 1, 3 по ГОСТ 25336-82 вместимостью 1000 см³ - 4 шт.

4.1.15 Воронки лабораторные, тип В, по ГОСТ 25336-82 диаметром: 36 мм - 1 шт., 56 мм - 4 шт.

4.1.16 Стаканы, тип В, исполнения 1 по ГОСТ 25336-82, вместимостью: 50 см³ - 2 шт., 1000 см³ - 6 шт.

4.1.17 Колонка газохроматографическая стеклянная длиной 1 м, с внутренним диаметром 3 мм.

4.1.18 Устройство для концентрирования экстрактов (аппарат Кудерна-Даниша, см. рисунок 1а) - 4 шт., или колбы с Г-образным отводом вместимостью 100 см³ (см. рисунок 1б) - 4 шт., или испаритель ротационный ИР-1М по ТУ 25-11-917 - 1 шт.

а) аппарат Кудерна-Даниша (1 - дефлегматор, 2 - средняя часть аппарата, 3 - пробирка для сбора концентрата); б) колба с Г-образным отводом

Рисунок 1 - Устройства для концентрирования экстрактов

4.1.19 Эксикатор исполнения 2, диаметром корпуса 250 мм по ГОСТ 25336-82.

4.1.20 Склянка для промывания газов типа СПТ по ГОСТ 25336-82.

4.1.21 Стаканчики для взвешивания (бюксы) по ГОСТ 25336-82: СВ-14/8 - 1 шт., СН 85/15 - 1 шт.

4.1.22 Чашки выпарительные 4 или 5 по ГОСТ 9147-80 - 2 шт.

4.1.23 Пипетки Пастера по ТУ 9464-001-52876351-2000 - 2 шт.

4.1.24 Палочки стеклянные по ГОСТ 27460-87 диаметром 5 или 6 мм - 4 шт.

4.1.25 Ложка фарфоровая по ГОСТ 9147-80 № 1.

4.1.26 Посуда стеклянная для отбора проб и хранения растворов и реактивов вместимостью 25, 50, 500, 1000 см³.

4.1.27 Воздушный компрессор любого типа для питания детектора газового хроматографа или воздух газообразный по ГОСТ 9.010-80.

4.1.28 Генератор водорода любого типа, вырабатывающий водород марки «А» по ГОСТ 3022-80.

4.1.29 Центрифуга с ротором-крестовиной и скоростью вращения 3000 - 4000 об/мин типа ЦЛС-3 с комплектом пробирок центрифужных стеклянных вместимостью 50 см³.

4.1.30 Микрокомпрессор аквариумный любого типа.

4.1.31 Насос вакуумный любого типа.

4.1.32 Муфельная печь с регулируемым нагревом любого типа.

4.1.33 Шкаф сушильный общелабораторного назначения с диапазоном температур до 200 °С.

4.1.34 Баня водяная любого типа.

4.1.35 Электроплитки по ГОСТ 14919-83.

4.1.36 Холодильник бытовой.

Примечание - Допускается использование других типов средств измерений, посуды и вспомогательного оборудования, в том числе импортных, с характеристиками не хуже, чем у приведенных в 4.1.

4.2 Реактивы и материалы

4.2.1 Хроматон N-AW-DMCS (N-AW-HMDS или N-Super) или Хромосорб W-HP (фракция 0,125 - 0,16 мм или 0,16 - 0,20 мм) с 5 % нанесенной неподвижной фазы SE-52, SE-54, или ДС-510

4.2.2 н-Гексан (далее - гексан) по ТУ 2631-003-05807999-98, х.ч.

4.2.3 Ацетон особой чистоты ОСЧ 9-5 по ТУ 2633-039-44493179-00.

4.2.4 Хлороформ (трихлорметан) по ТУ 2631-066-44493179-01, х.ч.

4.2.5 Кислота соляная по ГОСТ 3118-77, х.ч.

4.2.6 Натрий сернокислый, безводный (сульфат натрия) по ГОСТ 4166-76, ч.д.а.

4.2.7 Универсальная индикаторная бумага рН 1 - 12 по ТУ 6-09-1181-76.

4.2.8 Азот нулевой, марка «А» по ТУ 6-21-39-96 или азот газообразный ос.ч (1 сорт) по ГОСТ 9293-74.

4.2.9 Вода дистиллированная по ГОСТ 6709-72.

4.2.10 Уголь активный БАУ-А по ГОСТ 6217-74.

4.2.11 Стеклоткань или стекловата по ГОСТ 10146-74.

4.2.12 Вата медицинская по ГОСТ 5556-81.

4.2.13 Трубка из силиконовой резины с внутренним диаметром 5 или 6 мм.

Примечание - Допускается использование реактивов, изготовленных по другой нормативной и технической документации, в том числе импортных, с квалификацией не ниже указанной в 4.2.

5 Метод измерений

Выполнение измерений массовой концентрации хлоридазона газохроматографическим методом основано на извлечении хлоридазона из предварительно очищенной гексаном пробы воды экстракцией хлороформом и количественном определении с использованием азотселективного (термоионного или термоаэрозольного) детектора.

Идентификацию хлоридазона осуществляют по временам удерживания, расчет концентрации проводят по соотношению высот или площадей хроматографических пиков на хроматограммах градуировочных образцов и экстрактов пробы воды.

6 Требования безопасности, охраны окружающей среды

6.1 При выполнении измерений массовой концентрации хлоридазона в пробах природных и очищенных сточных вод соблюдают требования безопасности, установленные в национальных стандартах и соответствующих нормативных документах.

6.2 По степени воздействия на организм вредные вещества, используемые при выполнении измерений, относятся ко 2-му, 3-му и 4-му классам опасности по ГОСТ 12.1.007.

6.3 Содержание используемых вредных веществ в воздухе рабочей зоны не должно превышать установленных ПДК в соответствии с ГОСТ 12.1.005.

6.4 Выполнение измерений следует проводить при наличии вытяжной вентиляции Оператор, выполняющий измерения, должен быть проинструктирован о специфических мерах предосторожности при работе с пестицидом хлоридазоном.

6.5 Оператор, выполняющий измерения на хроматографе должен знать правила безопасности при работе с электрооборудованием и сжатыми газами

6.6 Градуировочные растворы и сливы органических растворителей собирают в герметично закрывающуюся посуду и утилизируют согласно установленным правилам

7 Требования к квалификации операторов

К выполнению измерений и обработке их результатов допускаются лица с высшим профессиональным образованием или со средним профессиональным образованием и стажем работы в лаборатории не менее 3 лет, владеющие техникой газохроматографического анализа и освоившие методику.

8 Требования к условиям измерений

При выполнении измерений в лаборатории должны быть соблюдены следующие условия:

- температура окружающего воздуха (20 ± 5) °С;

- атмосферное давление от 84,0 до 106,7 кПа (от 630 до 800 мм рт.ст.);

- влажность воздуха не более 80 % при 25 °С;

- напряжение в сети (220 ± 10) В;

- частота переменного тока в сети питания (50 ± 1) Гц.

9 Подготовка к выполнению измерений, в том числе отбор проб

При подготовке к выполнению измерений проводят следующие работы:

9.1 Отбор и хранение проб

Отбор проб для выполнения измерений массовой концентрации хлоридазона производится в соответствии с ГОСТ 17.1.5.05 и ГОСТ Р 51592. Оборудование для отбора проб должно соответствовать ГОСТ 17.1.5.04 и ГОСТ Р 51592. Из батометра пробу без фильтрования переносят в стеклянные бутыли вместимостью от 0,5 до 1,0 дм³ и закрывают притёртыми стеклянными или обёрнутыми тефлоновой пленкой или алюминиевой фольгой корковыми или полиэтиленовыми пробками. Применение полиэтиленовой посуды и резиновых пробок не допускается.

Пробы воды, предназначенные для определения в них хлоридазона допускается хранить не более 5 сут. при температуре от 5 °С до 7 °С. Перед проведением анализа пробы в этом случае подогревают до комнатной температуры.

Осушенные безводным сульфатом натрия хлороформные экстракты в стеклянной посуде с притертыми пробками могут храниться при температуре от 5 °С до 7 °С не более 5 сут.

9.2 Приготовление растворов и реактивов

9.2.1 Сульфат натрия безводный

Перед использованием сульфат натрия прокаливают в муфельной печи при температуре 400 °С в течение 8 ч. Прокаленный сульфат натрия хранят в колбе с притертой пробкой в эксикаторе.

9.2.2 Соляная кислота, водный раствор 1:1

Для приготовления раствора смешивают равные объемы концентрированной соляной кислоты и дистиллированной воды.

9.3 Приготовление фильтра для очистки воздуха

Используемый для упаривания экстрактов воздух необходимо очищать, пропуская через фильтр с активным углем. В качестве фильтра применяют склянку для очистки газов типа СПТ. Входной и выходной отростки склянки заполняют медицинской ватой и наполняют склянку активным углем. При этом выходную часть склянки наполняют активным углем так, чтобы его уровень не доходил до выходного отростка примерно на 3 - 4 см. После этого входной отросток склянки соединяют с аквариумным микрокомпрессором, а на выходной отросток надевают трубку из силиконовой резины. В другой конец трубки вставляют стеклянную пипетку Пастера. Струя очищенного воздуха, поступающего из пипетки при включении микрокомпрессора, используется для упаривания экстрактов.

9.4 Подготовка набивной колонки

Стеклянную газохроматографическую колонку с внутренним диаметром 3 мм и длиной 1 м промывают последовательно ацетоном и гексаном, сушат при температуре от 110 °С до 120 °С в сушильном шкафу и заполняют носителем с неподвижной фазой SE-52, SE-54, или ДС-510.

Для заполнения газохроматографической колонки один ее конец, который в дальнейшем будет подсоединяться к детектору, закрывают тампоном из промытого гексаном и хлороформом стекловолокна и присоединяют к вакуумному насосу через мелкую капроновую сетку. Затем включают насос и заполняют колонку носителем с фазой, добавляя последний небольшими порциями и постукивая колонку палочкой с резиновым концом при постоянно работающем насосе, следя за тем, чтобы носитель заполнял колонку равномерно, без разрывов.

Заполненную колонку закрывают тампоном из стекловолокна и помещают в термостат колонок хроматографа, подсоединив к испарителю, но не подсоединяя к детектору. Кондиционирование колонки целесообразно проводить следующим образом. Установив расход азота через колонку от 35 до 45 см³/мин, выдерживают колонку при температуре от 60 °С до 70 °С в течение 30 мин. Затем поднимают температуру термостата колонок со скоростью 3 град/мин до температуры 260 °С и при этой температуре кондиционируют колонку в течение 8 ч.

9.5 Подготовка хроматографа

Подготовку хроматографа проводят в соответствии с руководством по его эксплуатации. После кондиционирования колонки её также подсоединяют и к детектору, устанавливают расход газа-носителя (азота) через колонку от 35 до 45 см³/мин и проверяют герметичность соединений.

Устанавливают необходимый режим работы хроматографа. После выхода прибора на рабочий режим вводят несколько раз по 5 мм³ градуировочного образца хлоридазона № 3 или № 4 (см. 9.7) и проверяют эффективность работы колонки.

Примечание - вместо набивной колонки может быть использована капиллярная кварцевая колонка длиной 25 м диаметром 0,32 мм с аналогичной неподвижной фазой толщиной 0,25 - 0,50 мкм. Кондиционирование капиллярной колонки осуществляется в соответствии с ее паспортом.

Условия хроматографирования следует устанавливать свои для каждого конкретного хроматографа и колонки, исходя из приведённых ниже рекомендаций:

- температура испарителя...................................................... от 240 °С до 250 °С;

- температура колонки........................................................... от 230 °С до 250 °С;

- температура детектора, солевого источника (генератора аэрозоля), расход азота на поддув детектора, соотношение расходов водорода и воздуха - в соответствии с руководством по эксплуатации используемого хроматографа и детектора;

- расход азота через колонку.................................................. от 35 до 45 см³/мин;

- рабочий предел измерений на усилителе - в зависимости от определяемых концентраций;

- скорость диаграммной ленты (при использовании самописца).............. 240 мм/ч.

9.6 Приготовление градуировочных растворов хлоридазона

9.6.1 Градуировочные растворы готовят из ГСО, содержащего чистый реактив с массовой долей хлоридазона не менее 99 %. Для приготовления градуировочного раствора № 1 на лабораторных весах высокого класса точности взвешивают (0,0250 ± 0,0005) г хлоридазона. Навеску количественно переносят в мерную колбу с притертой пробкой вместимостью 25 см³, растворяют примерно в 20 см³ ацетона. Спустя 2 ч после растворения навески доводят объём раствора до метки на колбе ацетоном и перемешивают. Полученному раствору приписывают концентрацию хлоридазона 1000 мкг/см³.

Раствор хранят в герметично закрытой склянке в холодильнике не более 6 мес.

9.6.2 Для приготовления градуировочного раствора № 2 отбирают пипеткой с одной отметкой отбирают 5,0 см³ градуировочного раствора № 1, помещают его в мерную колбу вместимостью 50 см³, доводят объём колбы до метки ацетоном и перемешивают. Полученному раствору приписывают концентрацию хлоридазона 100 мкг/см³.

Раствор хранят в плотно закрытой склянке в холодильнике не более 3 мес.

9.6.3 Границы погрешности приготовления градуировочных растворов хлоридазона не превышают ±2 %.

9.7 Приготовление градуировочных образцов

Градуировочные образцы хлоридазона готовят в мерных колбах с притертыми пробками вместимостью 10 см³, отмеривая градуированными пипетками вместимостью 1 и 2 см³ указанные в таблице 2 объёмы градуировочных растворов соответствующих концентраций и помещая их в колбу. Объём раствора в мерной колбе доводят до метки ацетоном. Приписываемое градуировочному образцу значение массовой концентрации хлоридазона также приведено в таблице 2. Градуировочные образцы хранят в холодильнике в плотно закрытых склянках не более 1 мес.

Примечание - при отсутствии мерных колб вместимостью 10 см³ допускается использовать для приготовления градуировочных образцов градуированные пробирки вместимостью 10 см³.

Таблица 2 - Схема приготовления градуировочных образцов

10 Порядок выполнения измерений

10.1 Выполнение холостого опыта

Холостой опыт проводят перед анализом проб воды с целью проверки чистоты реактивов и материалов, используемых в анализе.

Для выполнения холостого измерения берут 500 см³ дистиллированной воды и анализируют её согласно 10.2 - 10.5.

Если на хроматограмме холостого опыта имеется пик с временем удерживания хлоридазона, то устанавливают, какой из реактивов или материалов загрязнен и проводят его очистку или заменяют этим же реактивом или материалом, но из другой партии.

10.2 Предварительная очистка проб воды гексаном

Отмеривают мерным цилиндром 500 см³ нефильтрованной пробы природной воды, помещают ее в стакан вместимостью 1000 см³, подкисляют раствором соляной кислоты (см. 9.2.2) до рН 3 по универсальной индикаторной бумаге и растворяют в пробе воды 50 г безводного сульфата натрия, добавляя его порциями в три приема. После растворения сульфата натрия переносят пробу в делительную воронку, вносят 25 см³ гексана, предварительно ополоснув им стакан, и встряхивают воронку в течение 3 мин. После экстракции содержимому воронки дают расслоиться в течение 15 - 30 мин. Водную фазу возвращают в химический стакан, а гексановый экстракт отбрасывают. Переносят пробу воды снова в делительную воронку и повторяют экстракцию новой порцией гексана.

После расслоения водную фазу переносят в тот же стакан, гексановый экстракт отбрасывают, воронку ополаскивают дважды по 10 см³ ацетоном и возвращают пробу воды в делительную воронку.

10.3 Извлечение хлоридазона из пробы воды

К очищенной гексаном пробе воды добавляют мерным цилиндром 30 см³ хлороформа и интенсивно экстрагируют пробу в течение 5 мин. Дают смеси в делительной воронке расслоиться от 15 до 30 мин. Хлороформный экстракт переносят в коническую колбу с притертой пробкой вместимостью 100 см³. К пробе воды в делительной воронке добавляют ещё 25 см³ хлороформа и повторяют экстракцию. После расслоения смеси экстракт переносят в ту же колбу, а воду отбрасывают.

10.4 Концентрирование экстракта

10.4.1 В колбу с объединенным хлороформным экстрактом вносят безводный сульфат натрия в количестве от 2 до 3 г при постоянном перемешивании содержимого колбы. Затем хлороформный экстракт фильтруют через предварительно смоченный хлорформом слой безводного сульфата натрия в количестве от 7 до 10 г, помещенного в воронку на подложку из обезжиренной ваты. Вату для обезжиривания промывают гексаном, а затем высушивают и хранят в плотно закрытом бюксе.

Колбу, в которой был экстракт, обмывают дважды по 5 см³ хлороформа, фильтруя промывные порции хлороформа через тот же слой безводного сульфата натрия, который затем дополнительно промывают 5 см³ хлороформа.

10.4.2 Если при экстракции хлорформом образовалась стойкая эмульсия, то объединенный экстракт перед его осушкой центрифугируют. Выделившейся слой воды аккуратно собирают пипеткой и отбрасывают, а слой хлороформа возвращают в коническую колбу. Центрифужную пробирку обмывают 5 см³ хлороформа, который объединяют с хлороформным экстрактом. После этого экстракт подвергают осушке согласно 10.4.1.

10.4.3 Весь фильтрат (экстракт и промывные порции хлороформа) собирают в аппарат Кудерна-Даниша. Подсоединяют к аппарату дефлегматор и помещают аппарат на водяную баню при температуре от 96 °С до 98 °С так, чтобы уровень воды в бане доходил до середины шлифа пробирки для концентрата. Необходимо следить, чтобы дефлегматор не охлаждался и кипение не прекращалось (при необходимости - защитить среднюю часть аппарата асбестовым экраном). Экстракт упаривают в этих условиях до объема, примерно, 0,5 см³. Удаление растворителя длится от 20 до 30 мин. Затем аппарат извлекают из водяной бани и охлаждают на воздухе. Дефлегматор и среднюю часть аппарата обмывают 3 см³ хлороформа и отсоединяют пробирку с концентратом. После отсоединения пробирки её содержимое упаривают досуха струей азота или очищенного воздуха.

Сухой остаток растворяют в ацетоне, приливая последний в пробирку аппарата Кудерна-Даниша по её стенкам, обмывая их. Объем ацетонового раствора сухого остатка доводят до 1 см³ добавлением по каплям ацетона или подпариванием струей азота или воздуха.

10.4.4 Вместо аппарата Кудерна-Даниша концентрирование экстрактов можно проводить в колбах с Г-образным отводом на водяной бане с температурой около 60 °С под струей воздуха или азота или с помощью ротационного испарителя (температура бани около 35 °С).

10.4.5 Если осушенный хлороформный экстракт необходимо оставить на хранение, то фильтрат хлороформного экстракта и промывных порций хлороформа, пропущенный через воронку с безводным сульфатом натрия, собирают в коническую колбу с притертой пробкой, которую затем помещают в холодильник при температуре от 5 °С до 7 °С. После хранения содержимое колбы переносят в аппарат для концентрирования экстрактов, обмывают колбу хлороформом объемом 5 см³, промывную порцию хлороформа также переносят в аппарат для концентрирования и упаривают.

10.5 Хроматографирование

В испаритель хроматографа вводят 5 мм³ градуировочного образца хлоридазона № 3 или № 4 и записывают хроматограмму. Устанавливают время удерживания хлоридазона по результатам трех хроматографирований. Этот параметр следует проверять ежедневно перед началом измерений после выхода хроматографа на рабочий режим. Время удерживания хлоридазона в зависимости от условий хроматографирования составляет от 6 до 8 мин.

Затем в испаритель хроматографа 2 - 3 раза вводят аликвоту (5 мм³) ацетонового раствора пробы (см. 10.4.3). Хлоридазон идентифицируют, сравнивая время его удерживания на хроматограмме градуировочного образца и пробы.

Для выполнения количественных расчетов массовой концентрации хлоридазона следует из приведенных в таблице 2 выбирать такой градуировочный образец, высота пика хлоридазона на хроматограмме которого наиболее близка к высоте его пика на хроматограмме пробы. Объемы вводимых в хроматограф аликвот градуировочного образца и пробы должны быть одинаковы.

Если концентрация хлоридазона в ацетоновом концентрате пробы превышает его концентрацию в образце № 5, то отбирают пипеткой или микрошприцем аликвоту концентрата, помещают ее в пробирку вместимостью 5 см³, добавляют ацетон до объема 1,0 см³, перемешивают и повторяют измерение. Аликвоту пробы для разбавления следует выбирать так, чтобы концентрация хлоридазона в разбавленном растворе была выше концентрации в образце № 4, но ниже концентрации в образце № 5.

10.6 Определение коэффициента учета потерь хлоридазона

В процессе анализа проб воды происходит некоторая потеря хлоридазона. Во избежание получения заниженных результатов, в формулу, по которой рассчитывают массовую концентрацию хлоридазона, введен коэффициент b, учитывающий эти потери. Величина потерь, главным образом, зависит от вида устройств, применяемых для концентрирования экстрактов, и типа анализируемой воды.

Для определения коэффициента b в два стакана вносят по 500 см³ природной воды определенного типа. В один из стаканов пипеткой вносят 1,0 см³ раствора градуировочного образца № 2 или № 3 и содержимое стакана тщательно перемешивают. Затем обе пробы анализируют согласно 10.2 - 10.5, применяя то устройство для концентрирования экстрактов, которое обычно применяются в данной лаборатории.

Пробы воды, как с добавками, так и без добавок, анализируют в трех повторностях. Рассчитывают коэффициент b по формуле

                                                             (1)

где С_д - массовая концентрация добавки хлоридазона к пробе воды, мкг/дм³,

X' - массовая концентрация хлоридазона в пробе воды с добавкой (среднее арифметическое из трех измерений), мкг/дм³;

X - массовая концентрация хлоридазона в пробе воды без добавки (среднее арифметическое из трех измерений), мкг/дм³.

Массовую концентрацию хлоридазона в пробах воды с добавками и без добавок X' и X, соответственно, находят по формуле (2) при b = 1.

Определение коэффициента учета потерь проводят для каждого типа воды, анализируемой в лаборатории.

Ориентировочная величина коэффициента b, полученная при метрологической аттестации методики, составляет 1,24.

10.7 Мешающие влияния и их устранение

Предварительная очистка проб воды гексаном уменьшает до приемлемого уровня мешающее влияние матрицы воды. В случае неоднозначной идентификации рекомендуется провести дополнительную идентификацию на колонке с другой фазой, либо на капиллярной колонке.

11 Обработка результатов измерений

Массовую концентрацию хлоридазона в анализируемой пробе воды X, мкг/дм³, рассчитывают по формулам

                                                 (2)

или                                              (3)

где C_гр - массовая концентрация хлоридазона в градуировочном образце, мкг/см³;

h_x - высота пика хлоридазона на хроматограмме пробы;

S_x - площадь пика хлоридазона на хроматограмме пробы;

V - объем концентрата пробы, см³;

η - степень разбавления концентрата пробы (если разбавление не проводилось, η = 1);

h_гр - высота пика хлоридазона на хроматограмме градуировочного образца;

S_гр - площадь пика хлоридазона на хроматограмме градуировочного образца;

V₁ - объём пробы воды, взятый для анализа, см³.

12 Оформление результатов измерений

12.1 Результат измерения в документах, предусматривающих его использование, представляют в виде

Х ± Δ, мкг/дм³ (Р = 0,95),                                           (4)

где ±Δ - границы характеристики погрешности результата измерения для данной массовой концентрации хлоридазона, мкг/дм³ (см. таблицу 1).

Численные значения результата измерения должны оканчиваться цифрой того же разряда, что и значения характеристики погрешности; последние не должны содержать более двух значащих цифр.

12.2 Допустимо представлять результат в виде

X ± Δ_л (Р = 0,95) при условии Δ_л < Δ,                               (5)

где ±Δ_л - границы характеристик погрешности результатов измерений, установленные при реализации методики в лаборатории и обеспечиваемые контролем стабильности результатов измерений.

12.3 Результаты измерений оформляют протоколом или записью в журнале по формам, приведенным в Руководстве по качеству лаборатории.

13 Контроль качества результатов измерений при реализации методики в лаборатории

13.1 Общие положения

13.1.1 Контроль качества результатов измерений при реализации методики в лаборатории предусматривает:

- оперативный контроль исполнителем процедуры выполнения измерений (на основе оценки погрешности при реализации отдельно взятой контрольной процедуры);

- контроль стабильности результатов измерений (на основе контроля стабильности среднеквадратического отклонения повторяемости, среднеквадратического отклонения внутрилабораторной прецизионности, погрешности).

13.1.2 Периодичность оперативного контроля и процедуры контроля стабильности результатов выполнения измерений регламентируют в Руководстве по качеству лаборатории.

13.2 Алгоритм оперативного контроля процедуры выполнения измерений с использованием метода добавок

13.2.1 Оперативный контроль исполнителем процедуры выполнения измерений проводят путем сравнения результатов отдельно взятой контрольной процедуры К_к с нормативом контроля К. Для выполнения контроля измеряют концентрацию хлоридазона в рабочей пробе без добавки и в пробе с известной добавкой. Добавка к пробе должна составлять не более 100 % от концентрации хлоридазона в пробе. При отсутствии хлоридазона в пробе добавка должна быть равна удвоенной минимально определяемой концентрации. Пробу с добавкой анализируют одновременно с рабочими пробами.

13.2.2 Результат контрольной процедуры К_к, мкг/дм³, рассчитывают по формуле

К_к = |Х' - Х - С_д|.                                                        (6)

13.2.3 Норматив контроля погрешности К, мкг/дм³ рассчитывают по формуле

                                                    (7)

где Δ_лх' - значения характеристики погрешности результатов измерений, установленные при реализации методики в лаборатории, соответствующие массовой концентрации хлоридазона в пробе с добавкой, мкг/дм³;

Δ_лх - значения характеристики погрешности результатов измерений, установленные при реализации методики в лаборатории, соответствующие массовой концентрации хлоридазона в рабочей пробе, мкг/дм³.

Примечание - Допустимо для расчета норматива контроля использовать значения характеристик погрешности, полученные расчетным путем по формулам Δ_лх' = 0,84 ∙ Δ_х' и Δ_лх = 0,84 ∙ Δ_х.

13.2.4 Если результат контрольной процедуры удовлетворяет условию

К_к ≤ К,                                                                 (8)

процедуру анализа признают удовлетворительной.

При невыполнении условия (8) контрольную процедуру повторяют. При повторном невыполнении условия (8) выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам, и принимают меры по их устранению.

14 Проверка приемлемости результатов, полученных в условиях воспроизводимости

14.1 Расхождение между результатами измерений, полученными в двух лабораториях, не должно превышать предела воспроизводимости R. При выполнении этого условия приемлемы оба результата измерений и в качестве окончательного может быть использовано их общее среднее значение. Значение предела воспроизводимости рассчитывают по формуле

R = 2,77 ∙ σ_R.                                                                 (9)

14.2 При превышении предела воспроизводимости могут быть использованы методы оценки приемлемости результатов измерений согласно ГОСТ Р ИСО 5725-6 (раздел 5) или МИ 2881.

14.3 Проверка приемлемости проводится при необходимости сравнения результатов измерений, полученных двумя лабораториями.

Лист регистрации изменений