Государственное санитарно-эпидемиологическое
нормирование Российской Федерации

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

ОПРЕДЕЛЕНИЕ ОСТАТОЧНЫХ
КОЛИЧЕСТВ ПЕСТИЦИДОВ
В ПИЩЕВЫХ ПРОДУКТАХ,
СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННОМ СЫРЬЕ
И ОБЪЕКТАХ ОКРУЖАЮЩЕЙ СРЕДЫ

Сборник методических указаний

МУК 4.1.1941 - 4.1.1954-05

Москва, 2009

1. Сборник подготовлен Федеральным научным центром гигиены им. Ф.Ф. Эрисмана (академик РАМН, проф. В.Н. Ракитский, проф. Т.В. Юдина); при участии специалистов Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека. Разработчики методов указаны в каждом из них.

2. Рекомендованы к утверждению Комиссией по государственному санитарно-эпидемическому нормированию при Федеральной службе по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека.

3. Утверждены Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации, Первым заместителем Министра здравоохранения Российской Федерации, академиком РАМН Г.Г. Онищенко.

4. Введены впервые.

УТВЕРЖДАЮ

Главный государственный санитарный врач

Российской Федерации,

Руководитель Федеральной службы

по надзору в сфере защиты прав потребителей и

благополучия человека

____________________ Г.Г. Онищенко

«18» января 2005 г.

МУК 4.1.1951-05

Дата введения 18.04.05

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
по измерению концентраций пирипроксифена в воздухе рабочей зоны методом высокоэффективной жидкостной хроматографии

Настоящие методические указания устанавливают метод высокоэффективной жидкостной хроматографии для определения в воздухе рабочей зоны массовой концентрации пирипроксифена в диапазоне 0,1 - 1 мг/м³.

Пирипроксифен - действующее вещество препарата АДМИРАЛ, 10 % КЭ, фирма производитель Кромптон, Англия.

4-феноксифенил (RS)-2-(2-пиридилокси)пропиловый эфир (IUPAC)

C₂₀H₁₉NO₃

Мол. масса 321,5

Бесцветное кристаллическое вещество (технический продукт - бледно желтое воскообразное вещество со слабым запахом). Температура плавления 47 °С. Давление паров при 23 °С - менее 0,013 мПа. Растворимость в органических растворителях при 20 - 25 °С (г/кг): гексан - 400; метанол - 200; ксилол - 500; метанол - 140. Растворимость в воле при 25 °С - 0,3679 мг/дм³. Коэффициент распределения н-октанол/вода: K_ow logP = 5,37 (25 °С).

Пирипроксифен устойчив к гидролизу: DT50 - более 367 дней (20 °С, рН 4 - 9).

Агрегатное состояние в воздухе - аэрозоль.

Краткая токсикологическая характеристика:

Острая пероральная токсичность (LD₅₀) для крыс > 5000 мг/кг; острая дермальная токсичность (LD₅₀) Для крыс > 2000 мг/кг; острая ингаляционная токсичность (LC₅₀) для крыс > 1300 мг/м³. Не раздражает кожу и слизистую глаз (кроликов).

Область применения препарата

Пирипроксифен - инсектицид контактного и кишечного действия из группы аналогов ювенильного гормона, подавляющий эмбриогенез и процесс метаморфоза насекомых. Активно подавляет развитие мух, жуков, комаров и других насекомых.

Ориентировочный безопасный уровень воздействия (ОБУВ) пирипроксифена в воздухе рабочей зоны - 1,0 мг/м³.

1. Погрешность измерений

Методика обеспечивает выполнение измерений с погрешностью (δ), не превышающей ± 25 %, при доверительной вероятности 0,95.

2. Метод измерения

Измерения концентраций пирипроксифена выполняют методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) на обращенной фазе с ультрафиолетовым детектором.

Концентрирование пирипроксифена из воздуха осуществляют на бумажные фильтры «синяя лента», экстракцию с фильтра проводят этанолом.

Нижний предел измерения в анализируемом объеме пробы - 4 нг.

Определению не мешают компоненты препаративной формы.

3. Средства измерений, вспомогательные устройства, реактивы и материалы

3.1. Средства измерений

Допускается использование средств измерения с аналогичными или лучшими характеристиками.

3.2. Реактивы

Допускается использование реактивов иных производителей с аналогичной или более высокой квалификацией.

3.3. Вспомогательные устройства, материалы

Допускается применение хроматографических колонок и другого оборудования с аналогичными или лучшими техническими характеристиками.

4. Требования безопасности

4.1. При работе с реактивами соблюдают требования безопасности, установленные для работ с токсичными, едкими, легковоспламеняющимися веществами по ГОСТу 12.1.005.

4.2. При выполнении измерений с использованием жидкостного хроматографа соблюдают правила электробезопасности в соответствии с ГОСТом 12.1.019 и инструкцией по эксплуатации прибора.

5. Требования к квалификации операторов

К выполнению измерений допускают специалистов, имеющих квалификацию не ниже лаборанта-исследователя, с опытом работы на жидкостном хроматографе.

6. Условия измерений

При выполнении измерений соблюдают следующие условия:

· процессы приготовления растворов и подготовки проб к анализу проводят при температуре воздуха (20 ± 5) °С и относительной влажности не более 80 %;

· выполнение измерений на жидкостном хроматографе проводят в условиях, рекомендованных технической документацией к прибору.

7. Подготовка к выполнению измерений

Перед выполнением измерений проводят очистку ацетонитрила (при необходимости), подготовку подвижной фазы для ВЭЖХ, приготовление растворов, кондиционирование хроматографической колонки, установление градуировочной характеристики, отбор проб.

7.1. Очистка ацетонитрила

Ацетонитрил кипятят с обратным холодильником над пентоксидом фосфора не менее 1 часа, после чего перегоняют, непосредственно перед употреблением ацетонитрил повторно перегоняют над прокаленным карбонатом калия.

7.2. Подготовка подвижной фазы № 1 для ВЭЖХ

В мерную колбу вместимостью 1000 см³ помещают 150 см³ воды, добавляют 850 см³ ацетонитрила, перемешивают, фильтруют и дегазируют.

7.3. Подготовка подвижной фазы № 2 для ВЭЖХ

В мерную колбу вместимостью 1000 см³ помещают 250 см³ воды, добавляют 750 см³ ацетонитрила, перемешивают, фильтруют и дегазируют.

7.3. Кондиционирование хроматографической колонки

Промывают колонку подвижной фазой № 1 (приготовленной по п. 7.2) при скорости подачи растворителя 1 см³/мин или подвижной фазой № 2 (приготовленной по п. 7.3) при скорости подачи растворителя 0,3 см³/мин до установления стабильной базовой линии.

7.4. Приготовление градуировочных растворов

7.4.1 Исходный раствор пирипроксифена для градуировки (концентрация 100 мкг/см³)

В мерную колбу вместимостью 100 см³ помещают 0,01 г пирипроксифена, доводят до метки ацетонитрилом, тщательно перемешивают. Раствор хранится в холодильнике в течение месяца.

Растворы № 1 - 5 готовят объемным методом путем последовательного разбавления исходного раствора.

7.4.2. Раствор № 1 пирипроксифена для градуировки (концентрация 10 мкг/см³)

В мерную колбу вместимостью 100 см³ помещают 10 см³ исходного раствора пирипроксифена с концентрацией 100 мкг/см³ (п. 7.4.1), разбавляют подвижной фазой (п. 7.2 или 7.3) до метки. Раствор хранится в холодильнике в течение 3-х суток.

7.4.3. Рабочие растворы № 2 - 5 пирипроксифена для градуировки (концентрация 0,2 - 2,0 мкг/см³)

В 3 мерные колбы вместимостью 100 см³ помещают по 2,0, 5,0 и 10,0 см³ градуировочного раствора № 1 с концентрацией 10 мкг/см³ (п. 7.4.2), доводят до метки подвижной фазой (п. 7.2 или 7.3), тщательно перемешивают, получают рабочие растворы №№ 2 - 4 с концентрацией пирипроксифена 0,2, 0,5 и 1,0 мкг/см³, соответственно. Для приготовления рабочего градуировочного раствора № 5 с концентрацией пирипроксифена 2,0 мкг/см³ используют 10 см³ градуировочного раствора № 1, разбавление проводят в мерной колбе вместимостью 50 см³.

Растворы хранятся в холодильнике в течение суток.

7.5. Отбор проб

Отбор проб воздуха проводят в соответствии с требованиями ГОСТ 12.1.005-88 «ССБТ. Общие санитарно-гигиенические требования к воздуху рабочей зоны».

В течение 15 минут последовательно отбирают 3 пробы, для чего воздух аспирируют в течение 5 минут с объемным расходом 2 - 5 дм³/мин через бумажный фильтр «синяя лента», помещенный в фильтродержатель.

Для измерения концентрации пирипроксифена на уровне 0,5 ОБУВ для воздуха рабочей зоны необходимо отобрать 2 дм³ воздуха. Срок хранения отобранных проб, помещенных в полиэтиленовые пакеты, в холодильной камере при +4 ° С - 5 дней.

7.6. Установление градуировочной характеристики

Градуировочную характеристику, выражающую зависимость площади пика (отн. единицы) от концентрации пирипроксифена в растворе (мкг/см³), устанавливают методом абсолютной калибровки по 4-м растворам для градуировки №№ 2 - 5.

В инжектор хроматографа вводят по 20 мм³ каждого градуировочного раствора и анализируют в условиях хроматографирования по п. 7.6.1.1 или 7.6.1.2. Осуществляют не менее 3-х параллельных измерений. Устанавливают площадь пика пирипроксифена.

7.6.1. Условия хроматографирования

Измерения выполняют при следующих режимных параметрах:

Жидкостной хроматограф с ультрафиолетовым детектором Perkin-Elmer (США)

Рабочая длина волны: 272 нм

Температура колонки: комнатная

Объем вводимой пробы: 20 мм³

7.6.1.1. Колонка стальная длиной 25 см, внутренним диаметром 4 мм, содержащая Кромасил 100 С18, зернением 7 мкм.

Подвижная фаза: ацетонитрил - вода (85:15, по объему)

Скорость потока элюента: 1 см³/мин

Чувствительность: 0,01 ед. абсорбции на шкалу

Ориентировочное время выхода пирипроксифена: 6,0 - 6,33 мин

7.6.1.2. Колонка стальная длиной 25 см, внутренним диаметром 2 мм, содержащая Spherisorb S5 ODS 2, зернением 5 мкм

Подвижная фаза: ацетонитрил - вода (75:25, по объему)

Скорость потока элюента: 0,3 см³/мин

Чувствительность: 0,02 ед. абсорбции на шкалу

Ориентировочное время выхода пирипроксифена: 6,8 - 7,0 мин

Линейный диапазон детектирования: 4 - 40 нг

Образцы, дающие пики большие, чем градуировочный раствор пирипроксифена с концентрацией 2,0 мкг/см³, разбавляют подвижной фазой (п. 7.2 или 7.3).

Градуировочный график проверяют ежедневно по анализу 2-х стандартных растворов различной концентрации. Если значения площади отличаются более, чем на 5 % от данных, заложенных в градуировочную характеристику, ее строят заново, используя свежеприготовленные рабочие стандартные растворы.

8. Выполнение измерений

Фильтр с отобранной пробой переносят в химический стакан вместимостью 100 см³, заливают 10 см³ этанола, оставляют на 4 - 5 минут, периодически перемешивая. Растворитель сливают, фильтр еще дважды обрабатывают новыми порциями этанола объемом 10 см³.

Объединенный экстракт упаривают в грушевидной колбе на ротационном вакуумном испарителе при температуре бани не выше 35 °С почти досуха, оставшийся растворитель отдувают потоком теплого воздуха, остаток растворяют в 5 см³ подвижной фазы №№ 1 или 2 и анализируют при условиях хроматографирования, указанных в п. 7.6.1.

Пробу вводят в инжектор хроматографа не менее двух раз. Устанавливают площадь пика, с помощью градуировочного графика определяют концентрацию пирипроксифена в хроматографируемом растворе.

Перед анализом опытной пробы проводят хроматографирование холостой (контрольной) пробы - экстракта неэкспонированного фильтра.

9. Обработка результатов измерений

Массовую концентрацию пирипроксифена в пробе воздуха рабочей зоны (X, мг/м³) рассчитывают по формуле:

где С - концентрация пирипроксифена в хроматографируемом растворе, найденная по градуировочному графику в соответствии с величиной площади хроматографического пика, мкг/см³;

W - объем экстракта, подготовленного для хроматографирования, см³;

V₂₀ - объем пробы воздуха, отобранный для анализа, приведенный к стандартным (давление 760 мм рт.ст., температура 20 °С) условиям, дм³.

где Т - температура воздуха при отборе пробы (на входе в аспиратор), град. С,

Р - атмосферное давление при отборе пробы, мм рт.ст.

u - расход воздуха при отборе пробы, дм³/мин,

t - длительность отбора пробы, мин.

Примечание: Идентификация и расчет концентрации пирипроксифена в пробах могут быть проведены с помощью программ обработки хроматографических данных с применением компьютера, включенного в аналитическую систему.

10. Оформление результатов измерений

За результат анализа () принимается среднее арифметическое результатов двух параллельных определений Х₁ и Х₂ , расхождение между которыми не превышает значений норматива оперативного контроля сходимости (d); |Х₁ - Х₂| £ d.

где d - норматив оперативного контроля сходимости, мг/м³;

d_отн. - норматив оперативного контроля сходимости, % (равен 10 %).

Результат количественного анализа представляют в виде:

· результат анализа  (мг/м³), характеристика погрешности δ, %, Р = 0,95 или , Р = 0,95, где

Результат измерений должен иметь тот же десятичный разряд, что и погрешность.

11. Контроль погрешности измерений

Оперативный контроль погрешности и воспроизводимости измерений осуществляется в соответствии с ГОСТ ИСО 5725-1-6. 2002 «Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений».

12. Разработчики

Юдина Т.В., Федорова Н.Е., Волкова В.Н. (Федеральный научный центр гигиены им. Ф.Ф. Эрисмана, г. Мытищи Московской обл.).

СОДЕРЖАНИЕ