Государственное санитарно-эпидемиологическое
нормирование Российской Федерации
4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ
ОПРЕДЕЛЕНИЕ
ОСТАТОЧНЫХ
КОЛИЧЕСТВ ПЕСТИЦИДОВ
В ПИЩЕВЫХ ПРОДУКТАХ,
СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННОМ СЫРЬЕ
И ОБЪЕКТАХ ОКРУЖАЮЩЕЙ СРЕДЫ
Сборник методических указаний
МУК 4.1.1941 - 4.1.1954-05
Москва, 2009
1. Сборник подготовлен Федеральным научным центром гигиены им. Ф.Ф. Эрисмана (академик РАМН, проф. В.Н. Ракитский, проф. Т.В. Юдина); при участии специалистов Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека. Разработчики методов указаны в каждом из них.
2. Рекомендованы к утверждению Комиссией по государственному санитарно-эпидемическому нормированию при Федеральной службе по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека.
3. Утверждены Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации, Первым заместителем Министра здравоохранения Российской Федерации, академиком РАМН Г.Г. Онищенко.
4. Введены впервые.
УТВЕРЖДАЮ
Главный государственный санитарный врач
Российской Федерации,
Руководитель Федеральной службы
по надзору в сфере защиты прав потребителей и
благополучия человека
___________________ Г.Г. Онищенко
«18»января 2005 г.
МУК 4.1.1945-05
Дата введения 18.04.05
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ ОСТАТОЧНЫХ КОЛИЧЕСТВ ДИКВАТА В
МОРКОВИ, ЛУКЕ, СЕМЕНАХ И МАСЛЕ СОИ МЕТОДОМ
ВЫСОКОЭФФЕКТИВНОЙ
ЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ
Настоящие методические указания устанавливают метод высокоэффективной жидкостной хроматографии для определения в моркови, луке, семенах и масле сои массовой концентрации диктата в диапазонах 0,025 - 0,05 мг/кг (морковь, лук) и 0,05 - 1,0 мг/кг (семена и масло сои).
Дикват - действующее вещество препарата Реглон Супер, ВР (150 г/л), фирма производитель Сингента АГРО АГ, Швейцария
1,1'-этилен-2,2'-дипиридилий; 9,10-дигидро-8а,10а-диазонийфенантрен; (ИЮПАК)
C12H12N2
Мол. масса 184,2
1,1'-этилен-2,2'-дипиридилий используется в виде дибромида
1,1-этилен-2,2-дипиридилий дибромид (ИЮПАК)
C12H12N7Br2
Мол масса 344,1
Химически чистый дикват дибромид представляет гигроскопическое белое кристаллическое вещество с температурой разложения 400 °С. Давление паров менее 0,01 мПа (моногидрат). Коэффициент распределения ROW log P = 4,60.
Хорошо растворим в воде (700 г/л), плохо в спиртах и практически нерастворим и неполярных органических растворителях.
Вещество стабильно в нейтральном и кислом растворах, но легко гидролизуется в щелочной среде. Разлагается под действием УФ-облучения (DT50 менее недели).
Сильно связывается почвами и быстро разрушается почвенными микроорганизмами (DT50 не адсорбированного диквата менее недели).
Краткая токсикологическая характеристика
Острая пероральная токсичность (LD50) для крыс - 408, для мышей - 234 мг/кг; острая дермальная токсичность (LD50) для крыс > 800 мг/кг. Вызывает раздражение кожи и глаз у кроликов. Мало токсичен для птиц, рыб, пчел, дождевых червей и водорослей.
Гигиенические нормативы для дикват дибромида: ОДК в почве - 0,2 мг/кг; ПДК в воде водоемов - 0,02 мг/дм3; МДУ в горохе - 0,05 мг/кг, в семенах подсолнечника - 0,5 мг/кг и в подсолнечном масле - 0,1 мг/кг.
Область применения препарата
Дикват дибромид - контактный гербицид сплошного действия. Используется для уничтожения однолетних широколистных сорняков в виноградниках, садах, посевах овощных и декоративных культур, водной растительности в водоемах, а также для предуборочной десикации семенников сахарной свеклы, клевера, сорго, подсолнечника, льна, хлопчатника, рапса, сои, риса. Применяется в дозах от 0,4 до 1,0 кг/га.
Метрологические характеристики метода представлены в таблицах 1 и 2.
Таблица 1
Метрологические параметры
Метрологические параметры, Р = 0,95, n = 24 |
|||||
Предел обнаружения, мг/кг |
Диапазон определяемых концентраций, мг/кг |
Среднее значение определения, % |
Стандартное отклонение, S, % |
Доверительный интервал среднего, % |
|
Морковь |
0,025 |
0,025 - 0,5 |
91,39 |
4,03 |
±1,9 |
Пук-репка |
0,025 |
0,025 - 0,5 |
93,18 |
2,30 |
±1,1 |
Соя семена |
0,05 |
0,05 - 1,0 |
75,74 |
4,20 |
±2,0 |
Соя масло |
0,05 |
0,05 - 1,0 |
93,66 |
2,51 |
±1,2 |
Таблица 2
Полнота извлечения диквата из проб моркови, лука, семян и масла сои (6 повторностей для каждой концентрации)
Внесено диквата мг/кг |
Обнаружено диквата мг/кг |
Полнота извлечения, % |
|
1 |
2 |
3 |
4 |
Морковь (корнеплоды) |
0,025 |
0,023454 ± 0,001380 |
93,82 |
0,05 |
0,043237 ± 0,004528 |
86,47 |
|
0,125 |
0,116577 ± 0,011004 |
93,26 |
|
0,5 |
0,459995 ± 0,028919 |
92,00 |
|
Лук (репка) |
0,025 |
0,023948 ± 0,001886 |
95,79 |
0,05 |
0,046528 ± 0,002190 |
93,06 |
|
0,125 |
0,114121 ± 0,007456 |
91,30 |
|
0,5 |
0,462960 ± 0,043758 |
92,59 |
|
Соя семена |
0,05 |
0,040198 ± 0,002956 |
80,40 |
0,1 |
0,076123 ± 0,006570 |
76,12 |
|
0,25 |
0,187795 ± 0,021087 |
75,12 |
|
1,0 |
0,714632 ± 0,074638 |
71,46 |
|
Соя масло |
0,05 |
0,047369 ± 0,002648 |
94,74 |
0,1 |
0,092082 ± 0,004963 |
92,08 |
|
0,25 |
0,231753 ± 0,020159 |
92,70 |
|
1,0 |
0,951320 ± 0,045784 |
95,13 |
Методика основана на определении вещества с помощью ион-парной высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) с ультрафиолетовым детектором после экстракции из анализируемых проб серной кислотой при кипячении, очистки экстрактов на колонке с катионитом, а также на патроне для твердофазной экстракции С18 Sep Pak.
Количественное определение проводится методом абсолютной калибровки.
Жидкостной хроматограф с флуориметрическим детектором с переменной длиной волны (фирмы Perkin-Elmer, США) |
Номер Госреестра 15945-97 |
Весы аналитические ВЛА-200 |
|
Весы лабораторные общего назначения, с наибольшим пределом взвешивания до 500 г и пределом допустимой погрешности +/- 0,038 г |
|
Колбы мерные вместимостью 2-50-2, 2-100-2, 2-250-2, 2-500-2, 2-1000-2 |
|
Меры массы |
|
Пипетки градуированные 2-го класса точности вместимостью 1,0; 2,0; 5,0; 10 см3 |
|
Пробирки градуированные с пришлифованной пробкой вместимостью 5 см3 |
|
Цилиндры мерные 2-го класса точности вместимостью 10, 25, 50, 100, 200, 500 и 1000 см3 |
Допускается использование средств измерения с аналогичными или лучшими характеристиками.
Дикват дибромид (моногидрат) с содержанием д.в. 99,7 % (50,9 % катионов) (Зенека, Великобритания) |
|
Аммония хлорид, хч |
|
Ацетонитрил для хроматографии, хч |
ТУ 6-09-4326-76 |
Ацетон, чда |
|
Вода дистиллированная или деионизованная |
ГОСТ 6702 |
н-Гексан, хч |
ТУ 6-09-3375 |
Диэтиламин для хроматографии, в ампулах |
ТУ 6-09-4356-77 |
Катионообменная смола Дауэкс 50 (50 - 100 меш), Na-форма (фирмы «Серва», Германия) или Дауэкс 50 WX8 (100 - 200) |
|
Кислота серная концентрированная, хч |
|
Кислота соляная (хлороводородная), хч |
|
Кислота орто-фосфорная, хч |
|
Метиловый спирт (метанол), хч |
|
Натрия гидроксид (едкий натр), хч |
|
Натрий хлористый, хч |
|
1-октансульфонат натрия |
|
Этилендиамин-N,N,N',N'-тетрауксусная кислота, динатриевая соль (Трилон Б) |
Допускается использование реактивов иных производителей с аналогичной или более высокой квалификацией.
Бумажные фильтры «красная лента», обеззоленные или фильтры из хроматографической бумаги Ватман 3ММ |
ТУ 6-09-2678-77 |
Воронка Бюхнера |
ГОСТ 0147 |
Воронка делительная вместимостью 250 и 1000 см3 |
|
Воронки конусные диаметром 30 - 37 и 60 мм |
|
Гомогенизатор |
|
Груша резиновая |
|
Дефлегматор елочный |
ГОСТ 9773 |
Индикаторная бумага универсальная |
|
Колбонагреватель электрический или электрическая плитка |
ТУ 92-275-76 |
Колбы плоскодонные вместимостью 100, 250, 400 - 500 см3 |
|
Колбы круглодонные на шлифе вместимостью 500 и 2000 см3 |
|
Колонка хроматографическая стеклянная, длиной 25 см, внутренним диаметром 10 мм |
|
Мельница электрическая |
|
Мембранные фильтры капроновые, диаметром 47 мм |
|
Набор для фильтрации растворителей через мембрану |
|
Насос водоструйный вакуумный |
ГОСТ 10696 |
Стаканы химические, вместимостью 100, 500 и 2000 см3 |
|
Стекловата |
|
Стеклянные палочки |
|
Патроны для твердофазной экстракции C18 Sep Pak (Waters, США) |
|
Установка для перегонки растворителей |
|
Холодильник водяной обратный |
|
Хроматографическая колонка стальная, длиной 25 см, внутренним диаметром 4,0 мм, содержащая Zorbax ODS, зернением 5 мкм |
|
Шприц для ввода образцов для жидкостного хроматографа вместимостью 50 - 100 мм3 |
|
Шприц медицинский с разъемом Льюера |
ГОСТ 22090 |
Допускается применение другого оборудования с аналогичными или лучшими техническими характеристиками.
4.1. При работе с реактивами соблюдают требования безопасности, установленные для работ с токсичными, едкими, легковоспламеняющимися веществами по ГОСТу 12.1/005.
4.2. При выполнении измерений с использованием жидкостного хроматографа соблюдают правила электробезопасности в соответствии с ГОСТом 12.1.019 и инструкцией по эксплуатации прибора.
К выполнению измерений допускают специалистов, имеющих квалификацию не ниже лаборанта-исследователя, с опытом работы на жидкостном хроматографе.
При выполнении измерений соблюдают следующие условия:
· процессы приготовления растворов и подготовки проб к анализу проводят при температуре воздуха (20 ± 5) °С и относительной влажности не более 80 %;
· выполнение измерений на жидкостном хроматографе проводят в условиях, рекомендованных технической документацией к прибору.
Выполнению измерений предшествуют следующие операции: очистка ацетонитрила (при необходимости), приготовление растворов, подвижной фазы для ВЭЖХ, кондиционирование хроматографической колонки, установление градуировочной характеристики, подготовка колонки с катеонитом и патронов для очистки экстрактов.
Ацетонитрил кипятят с обратным холодильником над пентоксидом фосфора не менее 1 часа, после чего перегоняют, непосредственно перед употреблением ацетонитрил повторно перегоняют над прокаленным карбонатом калия.
Навеску гидроксида натрия массой 3 г помещают в мерную колбу вместимостью 250 см3, растворяют в 100 - 150 см3 дистиллированной воды, доводят водой до метки, перемешивают.
В мерную колбу вместимостью 1000 см3 помещают 25 г хлорида аммония, растворяют в 600 - 700 см3 дистиллированной воды, доводят водой до метки, перемешивают.
В мерную колбу вместимостью 1000 см3 помещают 50 г двунатриевой соли этилендиаминтетрауксусной кислоты, растворяют в 600 - 700 см3 дистиллированной воды, доводят водой до метки, перемешивают.
В мерную колбу вместимостью 1000 см3 помещают 500 см3 дистиллированной воды, вносят 167 см3 концентрированной соляной кислоты, доводят водой до метки, перемешивают.
Навеску катионита Дауэкс 50 в натриевой форме массой 3,5 г (при исследовании моркови и лука). 10 г (при исследовании семян и масла сои) помещают в стакан вместимостью 100 см3, заливают 40 - 25 см3 воды. Через 30 мин суспензию переносят в хроматографическую колонку длиной 25 см, внутренним диаметром 10 мм, нижняя часть которой уплотнена тампоном из стекловаты. Дают растворителю стечь до верхнего края сорбента, затем колонку последовательно промывают 20 см3 насыщенного раствора хлорида натрия и 50 см3 дистиллированной воды со скоростью 3 - 5 см3/мин, после чего она готова к работе.
Примечание. При отсутствии катионита в натриевой форме используют ионообменную смолу в Н+-форме, подготовив ее по следующей методике:
Образец катионита Дауэкс 50 в Н+-форме помещают в химический стакан, заливают 5-кратным (по объему) количеством дистиллированной воды и оставляют для набухания на 24 часа. После этого воду декантируют, катионит обрабатывают 2 н. водным раствором гидроксида натрия при перемешивании в течение 2 часов. Затем раствор декантируют и смолу многократно промывают водой до нейтральной реакции. Отмытый катионит переносят на воронку Бюхнера, отфильтровывают и подсушивают до сыпучего состояния.
Концентрирующий патрон промывают с помощью медицинского шприца 2 см3 метанола со скоростью прохождения растворителя через патрон 10 - 20 см3/мин (время пропускания растворителя через патрон составляет около 10 сек). Патрон подготавливают непосредственно перед использованием для очистки экстракта.
В мерную колбу вместимостью 1000 см3 помещают 405 см3 деионизованной воды, 95 см3 ацетонитрила, перемешивают, фильтруют через мембранный фильтр. В раствор вносят 5 см3 орто-фосфорной кислоты, 5 см3 диэтиламина, 0,5 г октансульфоната натрия, перемешивают и помещают на ультразвуковую баню на 2 мин.
Промывают колонку подвижной фазой (приготовленной по п. 7.8) при скорости подачи растворителя 1 см3/мин не менее 2-х часов до установления стабильной базовой линии.
7.10.1 Исходный раствор диквата для градуировки (концентрация катиона диквата 1 мг/см3). В мерную колбу вместимостью 100 см3 помещают 0,1965 г диквата дибромида моногидрата (молекулярная масса 362,1, содержание катиона 50,9 %), растворяют в 40 - 50 см3 насыщенного водного раствора хлорида аммония, доводят насыщенным раствором хлорида аммония до метки, тщательно перемешивают.
7.10.2. Раствор диквата № 1 для градуировки (концентрация 100 мкг/см3).
В мерную колбу вместимостью 100 см3 помещают 10 см3 исходного раствора диквата с концентрацией 1 мг/см3 (п. 7.10.1), разбавляют насыщенным раствором хлористого аммония до метки.
Этот раствор используют для приготовления проб моркови, лука, семян сои с внесением при оценке полноты извлечения диквата из исследуемых образцов. Для внесения в образцы масла сои используют раствор с концентрацией 100 мкг/см3, приготовленный в смеси 2,5 %-ный раствор хлорида аммония - ацетон - гексан (1:4:5, по объему).
7.10.3. Раствор диквата № 2 для градуировки (концентрация 10 мкг/см3).
В мерную колбу вместимостью 100 см3 помещают 10 см3 раствора № 1 с концентрацией 100 мкг/см3 (п. 7.10.2), разбавляют насыщенным раствором хлористого аммония до метки.
Растворы хранят при комнатной температуре в темноте в течение 12-ти месяцев.
7.10.4. Рабочие растворы № 3 - 7 диквата для градуировки (концентрация 0,05 - 1,0 мкг/см3)
В 5 мерных колб вместимостью 100 см3 помещают по 0,5, 1,0, 2,5, 5,0 и 10,0 см3 градуировочного раствора № 2 с концентрацией 10 мкг/см3 (п. 7.10.3), доводят до метки насыщенным раствором хлорида аммония, тщательно перемешивают, получают рабочие растворы №№ 3 - 7 с концентрацией диквата 0,05, 0,1, 0,25, 0,5 и 1,0 мкг/см3, соответственно.
Растворы хранят при комнатной температуре в темноте.
Градуировочную характеристику, выражающую зависимость площади пика (мВ ´ сек) от концентрации диквата в растворе (мкг/см3), устанавливают методом абсолютной калибровки по 5-ти растворам для градуировки.
В инжектор хроматографа вводят по 20 мм3 каждого градуировочного раствора и анализируют в условиях хроматографирования по п. 9.4. Осуществляют не менее 3-х параллельных измерений.
Отбор проб производится в соответствии с правилами, определенными ГОСТами 11121-82 и 26313-84.
Отобранные пробы моркови и лука хранят в стеклянной или полиэтиленовой таре в холодильнике не более 10-ти дней. Для длительного хранения образцы замораживают и хранят при температуре -18 °С.
Пробы семян (помещенные в тканевую или бумажную упаковку) и масла сои (помещенные в стеклянные флаконы) хранят в темноте при комнатной температуре в течение 3-х месяцев.
Перед анализом образцы моркови, лука и семян сои измельчают.
9.1.1. Морковь, лук, семена сои
Образец измельченного лука и моркови массой 100 г, семян сои массой 50 г помещают в круглодонную колбу вместимостью 2000 см3, вносят 400 см3 (при исследовании лука и моркови) или 450 см3 (при исследовании семян сои) деионизованной воды. Осторожно приливают 15 см3 концентрированной серной кислоты. Колбу с подсоединённым к ней обратным холодильником и ёлочным дефлегматором помещают на электрический колбонагреватель и кипятят её содержимое в течение 5 час. Реакционную массу охлаждают. На этой стадии можно оставить раствор на ночь. Остывшую суспензию фильтруют под вакуумом на воронке Бюхнepa через фильтр из хроматографической бумаги Ватман 3 ММ (или бумажный фильтр «красная лента» в 2 слоя). Осадок на фильтре промывают двумя порциями дистиллированной воды по 100 см3. Переливают фильтрат в химический стакан вместимостью 2 дм3, доводят рН до 8 - 9 (по индикаторной бумаге) добавлением твердого гидроксида натрия (20 - 25 г) при постоянном перемешивании. Добавляют 50 см3 раствора ЭДТУ (приготовленного по п. 7.4), перемешивают, контролируют рН раствора (по индикаторной бумаге), если его значение выходит из диапазона 6 - 7, доводят его значение до указанных показателей, добавляя по каплям растворы ЭДТУ или гидроксида натрия. Снова фильтруют раствор под вакуумом на воронке Бюхнера через фильтр из хроматографической бумаги Ватман 3 ММ (или бумажный фильтр «красная лента» в 2 слоя), промывая стакан и фильтр 100 см3 дистиллированной воды. Фильтраты объединяют, доводят общий объем раствора до 1 дм3 и подвергают очистке по п. 9.2.
Образец масла массой 50 г помещают в круглодонную колбу вместимостью 2000 см3, вносят 450 см3 деионизованной воды. Осторожно приливают 15 см3 концентрированной серной кислоты. Колбу с подсоединённым к ней обратным холодильником и ёлочным дефлегматором помещают на электрический колбонагреватель и кипятят её содержимое в течение 5 час. Реакционную массу охлаждают. На этой стадии можно оставить раствор на ночь. Остывший раствор переносят в делительную воронку вместимостью 1000 см3, нижний водный слой отделяют, помещая в химический стакан вместимостью 2 дм3, доводят рН до 8 - 9 (по индикаторной бумаге) добавлением твердого гидроксида натрия (около 24 г) при постоянном перемешивании. Добавляют 50 см3 раствора ЭДТУ (приготовленного по п. 7.4), перемешивают, контролируют рН раствора (по индикаторной бумаге), если его значение выходит из диапазона 6 - 7, доводят его значение до указанных показателей, добавляя по каплям растворы ЭДТУ или гидроксида натрия. Фильтруют раствор под вакуумом на воронке Бюхнера через фильтр из хроматографической бумаги Ватман 3 ММ (или бумажный фильтр «красная лента» в 2 слоя), промывая стакан и фильтр 100 см3 дистиллированной воды. Фильтраты объединяют, доводят общий объем раствора до 1 дм3 и подвергают очистке по п. 9.2 и 9.3.
Объединенный фильтрат, полученный по п. 9.1.1 или 9.1.2, вводят со скорость 5 см3/мин в хроматографическую колонку, подготовленную по п. 7.6. С этой целью фильтрат переносят в делительную воронку, помещенную над колонкой, устанавливают (регулируя кран) скорость пропускания раствора 5 см3/мин. После введения пробы колонку последовательно промывают 25 см3 воды. 50 см3 2 н хлороводородной кислоты, 25 см3 воды, 100 см3 2,5 %-ного раствора хлорида аммония и 25 дм3 воды, которые отбрасывают. На этой стадии можно оставить колонку на ночь, при условии, что слой ионообменной смолы покрыт раствором. Дикват элюируют из колонки 50 см3 насыщенного раствора хлорида аммония со скоростью не более 1 см3/мин в мерную колбу вместимостью 50 см3. Раствор перемешивают.
Аликвоту раствора, полученного по п. 9.2, объемом 10 см3 вносят с помощью медицинского шприца на концентрирующий патрон С18 Sep Pak, подготовленный по п. 7.7. Скорость прохождения раствора через патрон должна составлять 10 - 20 см3/мин (время прохождения раствора через патрон 40 - 60 сек.). Первые 5 см3 элюата отбрасывают, вторую порцию объемом 5 см3 собирают в градуированную пробирку с пришлифованной пробкой, перемешивают и анализируют на содержание диквата по п. 9.3.
Жидкостной хроматограф с ультрафиолетовым детектором (фирмы Perkin-Elmer, США)
Колонка стальная длиной 25 см, внутренним диаметром 4 мм, содержащая Norbax ODS, зернением 5 мкм.
Температура колонки: комнатная
Подвижная фаза: ацетонитрил - вода (19 : 81, по объему)
+0,1 % (вес/объем) 1-октансульфонат натрия
+1,0 % (по объему) диэтиламин
+1,0 % (по объему) орто-фосфорная кислота
Скорость потока элюента: 1 см3/мин
Рабочая длина волны: 310 нм
Чувствительность: 0,01 ед. абсорбции на шкалу
Объем вводимой пробы: 20 мм3
Ориентировочное время выхода диквата: 3,4 - 4 мин
Линейный диапазон детектирования 1 - 10 нг
Образцы, дающие пики, большие, чем градуировочный раствор диквата с концентрацией 1,0 мкг/см3, разбавляют насыщенным раствором хлористого аммония.
Примечание: Ежедневно после завершения работы колонку необходимо промывать не менее 30 мин подвижной фазой метанол-вода (1:9, по объему), затем водой. Не рекомендуется оставлять на ночь в хроматографической системе фазу, содержащую комплекс ион-парных реагентов. Ежедневно перед началом работы до ввода в инжектор градуировочного раствора хроматографируют насыщенный раствор хлорида аммония. Эту операцию рекомендуется также осуществлять в течение рабочего дня после 4-х - 5-ти вводов аналитических образцов или градуировочных растворов.
Содержание диквата в пробе рассчитывают по формуле:
|
где
X - содержание диквата о пробе, мг/кг;
А - концентрация диквата в хроматографируемом растворе, найденная по градуировочному графику в соответствии с величиной площади хроматографического пика, мкг/см3;
V - объем экстракта, подготовленного для хроматографирования, см3;
m - масса анализируемого образца, г.
Оперативный контроль погрешности и воспроизводимости измерений осуществляется в соответствии с ГОСТ ИСО 5725-1-6. 2002 «Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений».
Юдина Т.В., Федорова Н.Е., Волкова В.Н. (Федеральный научный центр гигиены им. Ф.Ф. Эрисмана); Брагина И.В. (Федеральный центр Госсанэпиднадзора)
СОДЕРЖАНИЕ