4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ
ОПРЕДЕЛЕНИЕ ОСТАТОЧНЫХ КОЛИЧЕСТВ ПЕСТИЦИДОВ
В ПИЩЕВЫХ ПРОДУКТАХ, СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННОМ
СЫРЬЕ И ОБЪЕКТАХ ОКРУЖАЮЩЕЙ СРЕДЫ
Измерение концентраций
бенсульфурон-метила
в воздухе
рабочей зоны и атмосферном воздухе
населенных мест методами газожидкостной и
высокоэффективной жидкостной хроматографии
(дополнение к МУ 6104-91 от 27.07.91)
СБОРНИК МЕТОДИЧЕСКИХ УКАЗАНИЙ
МУК 4.1.1156-02
ВЫПУСК 1
МОСКВА
2004
1. Сборник подготовлен: Федеральным научным центром гигиены им. Ф.Ф. Эрисмана (чл.-корр. РАМН, проф. В.Н. Ракитский, проф. Т.В. Юдина); Московской сельскохозяйственной академией им. К.А. Тимирязева (проф. В.А. Калинин, к. хим. н. Довгилевич А.В.); Всероссийским НИИ фитопатологии (А.М. Макеев и др.); Всероссийским НИИ защиты растений (В.И. Долженко и др.); Санкт-Петербургским НИИ лесного хозяйства (Маслаков С.Е., Л.В. Григорьева и др.), при участии Департамента Госсанэпиднадзора Минздрава России (А.П. Веселов).
2. Методические указания рекомендованы к утверждению Комиссией по государственному санитарно-эпидемиологическому нормированию при Минздраве России.
3. Утверждены и введены в действие Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации, Первым заместителем Министра здравоохранения Российской Федерации, академиком РАМН Г.Г. Онищенко.
4. Введены впервые.
Главный государственный санитарный
врач Российской Федерации, Первый
заместитель Министра здравоохранения
Российской Федерации
Г.Г. Онищенко
Дата введения: 1 января 2003 г.
4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ
Измерение концентраций бенсульфурон-метила
в воздухе рабочей зоны и
атмосферном воздухе
населенных мест методами газожидкостной и
высокоэффективной жидкостной хроматографии
(дополнение к МУ 6104-91 от 27.07.91)
Методические указания
МУК 4.1.1156-02
1. Вводная часть
Фирма производитель: Дюпон де Немур (Швейцария).
Торговое название: ЛОНДАКС.
Действующее вещество: бенсульфурон-метил.
α-(4,6-диметоксипиримидинил-2-карбамоилсульфамоил-о-толуиловой кислоты метиловый эфир) IUPAC.
C16H18N4O7S M. м. 410,4
Твердый порошок от белого до бледно-желтого цвета без запаха.
Температура плавления: 181 °С.
Давление паров при 25 °С: 2,8 × 10-12 Па.
Растворимость в органических растворителях при 20 °С (г/дм3): метиленхлорид - 11,72; ацетонитрил - 5,38; этилацетат - 1,66 г/л; ацетон - 1,38; метанол - 0,99; ксилол - 0,29; гексан - менее 0,01. Растворимость в воде зависит от рН и составляет при 25 °С (г/дм3): 2,9 (рН 5); 12,0 (рН 6); 120 (рН 7) и 1200 (рН 8).
Агрегатное состояние в воздухе - аэрозоль
Краткая токсикологическая характеристика
Острая пероральная токсичность:
LD50 крысы - более 5000 мг/кг,
LD50 мыши - более 10985 мг/кг;
Острая дермальная токсичность:
LD50 кролики - более 2000 мг/кг;
Острая ингаляционная токсичность:
LD50 крысы - более 5000 мг/м3 (4 часа).
Гигиенические нормативы
ОБУВ в воздухе рабочей зоны - 1,0 мг/м3
ОБУВ в атмосферном воздухе - 0,05 мг/м3.
Область применения препарата
Лондакс 60 DF с.т.с. (д. в. бенсульфурон-метил - 600 г/кг) - гербицид избирательного действия, рекомендуемый для борьбы с широколиственными сорняками и осоками на рисовых полях при однократной послевсходовой обработке с нормой расхода 50 - 100 г/га (по д. в. 30 - 60 г/га).
2. Методика измерения концентраций бенсульфурон-метила в воздухе рабочей зоны и атмосферном воздухе населенных мест методами газожидкостной и высокоэффективной жидкостной хроматографии
2.1. Основные положения
2.1.I. Принцип методики
Методика основана на определении бенсульфурон-метила с помощью газожидкостной хроматографии с термоионным детектором или высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) с ультрафиолетовым детектором.
Отбор проб воздуха осуществляется концентрированием аэрозоля на бумажные фильтры «синяя лента». Количественное определение проводится методом абсолютной калибровки.
2.1.2. Избирательность метода
В предлагаемых условиях метод специфичен в присутствии компонентов препаративной формы, в том числе Тренда 90, а также пестицидов, применяемых при возделывании риса.
2.1.3. Метрологическая характеристика метода (Р = 0,95)
|
6 |
|
|
Предел обнаружения в хроматографируемом объеме |
2 нг (измерение по п. 2.7.1, ГЖХ) |
|
1 нг (измерение по п. 2.7.2, ВЭЖХ) |
|
|
Предел обнаружения в воздухе (при отборе 50 л) |
0,04 мг/м3 (ГЖХ) |
|
0,01 мг/м3 (ВЭЖХ) |
|
|
Диапазон определяемых концентраций |
0,04 - 0,60 мг/м3 (ГЖХ) |
|
0,01 - 0,1 мг/м3 (ВЭЖХ) |
|
|
Среднее значение определения |
94,98 % |
|
Стандартное отклонение (S) |
5,63 % |
|
Относительное стандартное отклонение (DS) |
2,52 % |
|
Доверительный интервал среднего |
6,98 % |
|
Суммарная погрешность измерения не превышает |
22 % (ГЖХ) |
|
и 20 % (ВЭЖХ) |
2.2. Реактивы, растворы и материалы
|
Бенсульфурон-метил с содержанием д. в. 99,8 %, (Дюпон де Немур, Швейцария) |
|
|
Азот, осч, из баллона |
ГОСТ 9293-79 |
|
Ацетон, чда |
|
|
Ацетонитрил для хроматографии, хч |
ТУ 6-09-4326-76 |
|
Вода бидистиллированная или деионизованная |
|
|
Водород газообразный из баллона |
|
|
Метиловый спирт, хч |
|
|
Кислота ортофосфорная, хч 0,2 %-ный по объему водный раствор |
|
|
Хроматон-супер с 5 % OV-17 (0,16 - 0,20 мм) |
|
|
Бумажные фильтры «синяя лента», обеззоленные, предварительно промытые ацетоном |
ТУ 6-09-2678-77 |
2.3. Приборы, аппаратура, посуда
|
|
|
|
Хроматографическая колонка стеклянная, длиной 2 м, внутренним диаметром 3 мм |
|
|
Жидкостный хроматограф с ультрафиолетовым детектором фирмы Perkin-Elmer (США) или аналогичный |
|
|
Хроматографическая колонка стальная, длиной 25 см, внутренним диаметром 4,6 мм, содержащая Hipersil ODS, зернением 5 мкм |
|
|
Микрошприц типа МШ-10, вместимостью 10 мкл |
|
|
Шприц для ввода образцов для жидкостного хроматографа |
|
|
Ротационный вакуумный испаритель ИР-1М или аналогичный |
ТУ 25-11-917-76 |
|
Весы аналитические типа ВЛА-200 |
ГОСТ 34104-80Е |
|
Насос водоструйный |
ГОСТ 10696-75 |
|
Аспирационное устройство типа ЭА-1 или аналогичное |
ТУ 25-11-1414-78 |
|
Барометр |
ТУ 2504-1797-75 |
|
Термометр лабораторный шкальный ТЛ-2, цена деления 1 °С, пределы измерения 0 - 55 °С |
ГОСТ 215-73Е |
|
Колбы мерные, вместимостью 100 мл |
|
|
Цилиндры мерные, вместимостью 10, 50 и 500 мл |
|
|
Колбы грушевидные со шлифом, вместимостью 100 мл |
ГОСТ 10394-72 |
|
Пробирки центрифужные |
|
|
Стаканы химические, вместимостью 100 мл |
|
|
Пипетки, вместимостью 1, 2, 5 и 10 мл |
|
|
Воронки химические, конусные, диаметром 34 - 40 мм |
|
|
Груша резиновая |
|
|
Фильтродержатели |
|
|
Стеклянные палочки |
|
2.4. Отбор проб
Воздух со скоростью 2 - 5 л/мин аспирируют через фильтр «синяя лента», помещенный в фильтродержатель.
Для измерения 0,5 ОБУВ в воздухе рабочей зоны следует отобрать 4 (ГЖХ) или 1 л воздуха (ВЭЖХ); 0,8 ОБУВ в атмосферном воздухе - 50 (ГЖХ) или 12,5 л воздуха (ВЭЖХ). Отобранные пробы можно хранить в холодильнике не более 10 дней.
2.5. Подготовка к определению
2.5.1. Метод ГЖХ. Подготовка и кондиционирование колонки
Готовую насадку (5 % OV-17 на Хроматоне-супер) засыпают в стеклянную колонку, уплотняют под вакуумом, колонку устанавливают в термостате хроматографа, не подсоединяя к детектору, и стабилизируют в токе азота при температуре 260 °С в течение 10 - 12 часов.
2.5.2. Метод ВЭЖХ
2.5.2.1. Подготовка подвижной фазы для ВЭЖХ. В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 400 мл ацетонитрила, 50 мл метанола и 550 мл бидистиллированной воды, содержащей 0,2 % об. ортофосфорной кислоты, перемешивают, фильтруют и дегазируют.
2.5.2.2. Кондиционирование колонки. Промывают колонку для ВЭЖХ смесью ацетонитрил-метанол-вода, содержащей 0,2 % об. ортофосфорной кислоты (40 : 5 : 55, по объему) в течение 30 - 45 мин при скорости подачи растворителя 1 мл/мин до получения стабильной базовой линии.
2.5.3. Приготовление стандартных растворов
Стандартный раствор бенсульфурон-метила с содержанием 100 мкг/мл готовят растворением 0,0100 г вещества в ацетоне (измерение по п. 2.7.1, ГЖХ) или ацетонитриле (измерение по п. 2.7.2, ВЭЖХ) в мерной колбе на 100 мл. Раствор хранится в холодильнике в течение 3 месяцев.
Для измерения по п. 2.7.1 (ГЖХ) готовят рабочие стандартные растворы с концентрацией 2,0; 4,0; 6,0; 8,0; 10; 20 и 30 мкг/мл путем последовательного разбавления ацетоном раствора, содержащего 100 мкг/мл бенсульфурон-метила в ацетоне. Растворы хранятся в холодильнике в течение 15 дней.
Для измерения по п. 2.7.2 (ВЭЖХ) готовят рабочие стандартные растворы с концентрацией 0,05; 0,1; 0,15; 0,3 и 0,5 мкг/мл путем последовательного разбавления раствора, содержащего 100 мкг/мл бенсульфурон-метила в ацетонитриле, смесью ацетонитрил-вода (1 : 1, по объему). Растворы готовят непосредственно перед употреблением.
2.5.4. Построение градуировочного графика
2.5.4.1. Градуировочный график А (измерение по п. 2.7.1, ГЖХ). Для построения градуировочного графика в испаритель хроматографа вводят по 1 мкл рабочего стандартного раствора бенсульфурон-метила в ацетоне с концентрацией 2,0; 4,0; 6,0; 8,0; 10; 20 и 40 мкг/мл.
2.5.4.2. Градуировочный график Б (измерение по п. 2.7.2, ВЭЖХ). Для построения градуировочного графика в инжектор хроматографа вводят по 20 мкл рабочего стандартного раствора бенсульфурон-метила с концентрацией 0,05; 0,1; 0,15; 0,3 и 0,5 мкг/мл.
Осуществляют не менее 5 параллельных измерений. Находят среднее значение высоты хроматографического пика для каждой концентрации. Строят градуировочный график (А или Б) зависимости высоты или площади хроматографического пика (в мм или относительных единицах, соответственно) от концентрации бенсульфурон-метила в растворе (в мкг/мл).
2.6. Описание определения
Фильтр с отобранной пробой переносят в химический стакан вместимостью 100 мл, заливают 10 мл ацетона, оставляют на 5 - 7 минут, периодически перемешивая. Растворитель сливают, отжимая фильтр стеклянной палочкой. Фильтр еще дважды обрабатывают новыми порциями ацетона объемом 10 мл.
Объединенный экстракт упаривают в грушевидной колбе на ротационном вакуумном испарителе при температуре бани 35 - 40 °С почти досуха, оставшийся растворитель отдувают потоком теплого воздуха, остаток растворяют в 1 мл ацетона (измерение по п. 2.7.1, ГЖХ) или 10 мл смеси растворителей ацетонитрил-вода, 1 : 1, по объему (измерение по п. 2.7.2, ВЭЖХ) и хроматографируют.
2.7. Условия хроматографирования
2.7.1. ГЖХ
Хроматограф газовый «Цвет-570» с термоионным детектором с пределом детектирования по азоту в азобензоле 1,5 × 10-12 г/см3.
Колонка стеклянная длиной 2 м, внутренним диаметром 3 мм, заполненная Хроматоном-супер с 5 % OV-17 (0,16 - 0,20 мм)
Рабочая шкала электрометра 8 × 109 Ом
Скорость движения ленты самописца 240 мм/ч
Температура термостата колонки 250 °С
детектора 340 °С
испарителя 290 °С
Скорость газа-носителя (азота) 35 ± 1 мл/мин
водорода 17 ± 1 мл/мин
воздуха 200 мл/мин
Объем вводимой пробы 1 мкл
Время выхода бенсульфурон-метила 3 мин 20 с
Линейный диапазон детектирования 2 - 30 нг
Образцы, дающие пики большие, чем стандартный раствор с концентрацией 30 мкг/мл, разбавляют ацетоном.
2.7.2. ВЭЖХ
Жидкостный хроматограф с ультрафиолетовым детектором фирмы Perkin-Elmer (США)
Хроматографическая колонка стальная, длиной 25 см, внутренним диаметром 4,6 мм, содержащая Hipersil ODS, зернением 5 мкм.
|
комнатная |
|
|
Подвижная фаза |
ацетонитрил-метанол-вода, содержащая 0,2 % об. ортофосфорной кислоты (40 : 5 : 55, по объему) |
|
Скорость потока элюента |
1 мл/мин |
|
Рабочая длина волны |
254 нм |
|
Чувствительность |
0,01 ед. абсорбции на шкалу |
|
Объем вводимой пробы |
20 мкл |
|
Время выхода бенсульфурон-метила |
8,32 - 8,40 мин |
|
Линейный диапазон детектирования |
1 - 10 нг |
Образцы, дающие пики большие, чем стандартный раствор с концентрацией 0,5 мкг/мл, разбавляют смесью растворителей ацетонитрил-вода (1 : 1, по объему).
2.8. Обработка результатов анализа
Содержание бенсульфурон-метила рассчитывают методом абсолютной калибровки по формуле:
,
где
Х - содержание бенсульфурон-метила в пробе воздуха, мг/м3;
С - концентрация бенсульфурон-метила в хроматографируемом растворе, найденная по градуировочному графику, мкг/мл;
W - объем экстракта, подготовленного для хроматографирования, мл;
V - объем пробы воздуха, отобранного для анализа, приведенного к стандартным условиям (давление 760 мм рт. ст., температура 20 °С), дм3.
,
где
Т - температура воздуха при отборе пробы (на входе в аспиратор), °С;
Р - атмосферное давление при отборе пробы, мм рт. ст.;
и - расход воздуха при отборе пробы, дм3/мин;
t - длительность отбора пробы, мин.
3. Требования техники безопасности
Необходимо соблюдать требования безопасности при работе в химических лабораториях в соответствии с «Правилами устройства, техники безопасности, производственной санитарии, противоэпидемического режима и личной гигиены при работе в лечебных и санитарно-эпидемиологических учреждениях системы МЗ СССР» (№ 2455-81 от 20.10.81), а также требования, изложенные в документации на приборы.
4. Разработчики
Ракитский В.Н., член-корр. РАМН, проф., Юдина Т.В., Федорова Н.Е., Мошлакова Л.А. (Федеральный научный центр гигиены им. Ф.Ф. Эрисмана, г. Мытищи Московской обл.).
СОДЕРЖАНИЕ
|
2.2. Реактивы, растворы и материалы.. 3 2.3. Приборы, аппаратура, посуда. 3 2.5. Подготовка к определению.. 4 2.7. Условия хроматографирования. 5 2.8. Обработка результатов анализа. 6 |