4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ
ОПРЕДЕЛЕНИЕ ОСТАТОЧНЫХ КОЛИЧЕСТВ ПЕСТИЦИДОВ
В ПИЩЕВЫХ ПРОДУКТАХ, СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННОМ
СЫРЬЕ И ОБЪЕКТАХ ОКРУЖАЮЩЕЙ СРЕДЫ
Измерение концентраций
квизалофоп-П-тефурила
в воздухе
рабочей зоны методом высокоэффективной
жидкостной хроматографии
СБОРНИК МЕТОДИЧЕСКИХ УКАЗАНИЙ
МУК 4.1.1139-02
ВЫПУСК 1
МОСКВА
2004
1. Сборник подготовлен: Федеральным научным центром гигиены им. Ф.Ф. Эрисмана (чл.-корр. РАМН, проф. В.Н. Ракитский, проф. Т.В. Юдина); Московской сельскохозяйственной академией им. К.А. Тимирязева (проф. В.А. Калинин, к. хим. н. Довгилевич А.В.); Всероссийским НИИ фитопатологии (А.М. Макеев и др.); Всероссийским НИИ защиты растений (В.И. Долженко и др.); Санкт-Петербургским НИИ лесного хозяйства (Маслаков С.Е., Л.В. Григорьева и др.), при участии Департамента Госсанэпиднадзора Минздрава России (А.П. Веселов).
2. Методические указания рекомендованы к утверждению Комиссией по государственному санитарно-эпидемиологическому нормированию при Минздраве России.
3. Утверждены и введены в действие Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации, Первым заместителем Министра здравоохранения Российской Федерации, академиком РАМН Г.Г. Онищенко.
4. Введены впервые.
Главный государственный санитарный
врач Российской Федерации, Первый
заместитель Министра здравоохранения
Российской Федерации
Г.Г. Онищенко
Дата введения: 1 января 2003 г.
4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ
Измерение концентраций квизалофоп-П-тефурила
в воздухе рабочей зоны методом
высокоэффективной
жидкостной хроматографии
Методические указания
МУК 4.1.1139-02
1. Вводная часть
Фирма производитель: Юнирояль Кэмикал Лтд. (Великобритания).
Торговое название: ПАНТЕРА.
Действующее вещество: квизалофоп-П-тефурил.
Название д. в. по номенклатуре ИЮПАК: Тетрагидрофурфуриловый эфир (R)-2[4-(6-хлорхиноксалин-2-илокси)фенокси]пропионовой кислоты.
C22H21ClN2O5 M. м: 428,9
Кристаллическое вещество белого цвета без запаха.
Давление паров: < 5,9 × 10-8 мм Hg при 25 °С.
Растворимость (г/л при 25 °С): в воде - 0,009, метаноле - 64,39, толуоле - 651,70, гексане - 12,43.
Температура плавления: 72,5 - 74,5 °С.
Коэффициент распределения в системе октанол/вода - logp - 4,3222.
Агрегатное состояние в воздухе рабочей зоны - аэрозоль.
Краткая токсикологическая характеристика
Острая пероральная токсичность (LD50) для крыс - более 1019 мг/кг; острая дермальная токсичность (LD50) для кроликов - более 2000 мг/кг.
Гигиенические нормативы
ОБУВ для воздуха рабочей зоны - 0,5 мг/м3;
ОБУВ для атмосферного воздуха - 0,005 мг/м3.
Область применения препарата
Квизалофоп-П-тефурил - новый послевсходовый гербицид, рекомендуемый для уничтожения однолетних и многолетних сорняков на посадках картофеля, посевах сахарной и столовой свеклы.
2. Методика измерения концентраций квизалофоп-П-тефурила методом высокоэффективной жидкостной хроматографии в воздухе рабочей зоны
2.1. Основные положения
2.1.1. Принцип метода
Метод основан на определении квизалофоп-П-тефурила с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) на обращенной фазе с ультрафиолетовым детектором.
Отбор проб воздуха осуществляется концентрированием аэрозоля на бумажные фильтры «синяя лента».
Количественное определение проводится методом абсолютной калибровки.
2.1.2. Избирательность метода
В предлагаемых условиях метод специфичен в присутствии компонентов препаративной формы, а также пестицидов, применяемых при возделывании сахарной свеклы и картофеля.
2.1.3. Метрологическая характеристика метода (Р = 0,95)
|
6 |
|
|
Предел обнаружения в хроматографируемом объеме |
5 нг (измерение по п. 2.7.1); |
|
1,0 нг (измерение по п. 2.7.2) |
|
|
Предел обнаружения в воздухе |
0,05 мг/м3 (при отборе 10 л воздуха) |
|
Диапазон определяемых концентраций |
0,05 - 1,5 мг/м3 |
|
Среднее значение определения |
97,1 % |
|
Стандартное отклонение (S) |
6,89 % |
|
Относительное стандартное отклонение (DS) |
2,82 % |
|
Доверительный интервал среднего |
7,27 % |
|
Суммарная погрешность измерения не превышает |
23 % |
2.2. Реактивы и материалы
|
Квизалофоп-П-тефурил с содержанием д. в. 99,8 % (Юнирояль Кэмикал Лтд, Великобритания) |
|
|
Ацетонитрил для хроматографии, хч |
ТУ 6-09-4326-76 |
|
Вода бидистиллированная или деионизованная |
|
|
Бумажные фильтры «синяя лента», обеззоленные, предварительно промытые ацетонитрилом |
ТУ 6-09-2678-77 |
2.3. Приборы, аппаратура, посуда
|
Жидкостный хроматограф с ультрафиолетовым детектором фирмы Perkin-Elmer (США) или аналогичный |
|
|
Хроматографическая колонка стальная, длиной 25 см, внутренним диаметром 4,6 мм, Hipersil ODS, зернением 5 мкм |
|
|
Шприц для ввода образцов для жидкостного хроматографа |
|
|
Жидкостный хроматограф Милихром с ультрафиолетовым детектором |
|
|
Хроматографическая колонка стальная, длиной 64 мм, внутренним диаметром 2 мм, заполненная Сепароном С18, зернением 5 мкм |
|
|
Ротационный вакуумный испаритель ИР-1М или аналогичный |
ТУ 25-11-917-76 |
|
Весы аналитические типа ВЛА-200 |
ГОСТ 34104-80Е |
|
Насос водоструйный |
ГОСТ 10696-75 |
|
Аспирационное устройство типа ЭА-1 или аналогичное |
ТУ 25-11-1414-78 |
|
Барометр |
ТУ 2504-1797-75 |
|
Термометр лабораторный шкальный ТЛ-2, цена деления 1 °С, пределы измерения 0 - 55 °С |
ГОСТ 215-73Е |
|
Колбы мерные, вместимостью 100 и 1000 мл |
|
|
Цилиндры мерные, вместимостью 10, 50, 500 мл |
|
|
Колбы грушевидные со шлифом, вместимостью 100 мл |
ГОСТ 10394-72 |
|
Стаканы химические, вместимостью 100 мл |
|
|
Пипетки, вместимостью 1, 2, 5 и 10 мл |
|
|
Воронки химические, конусные, диаметром 34 - 40 мм |
|
|
Фильтродержатели |
|
|
Стеклянные палочки |
2.4. Отбор проб
Отбор проб воздуха рабочей зоны следует осуществлять в соответствии с требованиями ГОСТ 12.1.005-88 «ССБТ. Общие санитарно-гигиенические требования к воздуху рабочей зоны».
В течение 15 мин последовательно отбирают 3 пробы, для чего воздух с объемным расходом 2,0 - 3,0 л/мин аспирируют в течение 5 мин через фильтр «синяя лента».
Фильтры с отобранными пробами, упакованные в полиэтиленовые пакеты, можно хранить в холодильнике при 4 - 6 °С в течение 5 дней.
2.5. Подготовка к определению
2.5.1. Подготовка подвижной фазы для ВЭЖХ
Отмеряют 300 мл воды, переносят в колбу на 1000 мл, добавляют до метки ацетонитрил, перемешивают и дегазируют.
2.5.2. Кондиционирование колонки
Промыть колонку для ВЭЖХ смесью ацетонитрил-вода (7 : 3, по объему) в течение 30 мин при скорости подачи растворителя 100 мкл/мин (измерение по п. 2.7.1) или 1 мл/мин (измерение по п. 2.7.2).
2.5.3. Приготовление стандартных растворов
Основной стандартный раствор квизалофоп-П-тефурила с содержанием 100 мкг/мл готовят растворением 0,0100 г вещества в ацетонитриле в мерной колбе на 100 мл. Раствор хранится в холодильнике в течение месяца.
Рабочие стандартные растворы с концентрацией 0,5; 1,0; 2,0; 5,0; 10 и 15 мкг/мл (измерение по п. 2.7.1) готовят из основного стандартного раствора квизалофоп-П-тефурила соответствующим последовательным разбавлением подвижной фазой для ВЭЖХ (п. 2.5.1).
Рабочие стандартные растворы с концентрацией 0,05; 0,1; 0,2; 0,3 и 0,5 мкг/мл (измерение по п. 2.7.2) готовят из основного стандартного раствора квизалофоп-П-тефурила соответствующим последовательным разбавлением подвижной фазой для ВЭЖХ (п. 2.5.1).
Рабочие растворы хранятся в холодильнике в течение 3 дней.
2.5.4. Построение градуировочного графика
2.5.4.1. Градуировочный график А (измерение по п. 2.7.1). Для построения градуировочного графика в инжектор хроматографа вводят по 10 мкл рабочего стандартного раствора квизалофоп-П-тефурила с концентрацией 0,5; 1,0; 2,0; 5,0; 10,0 и 15,0 мкг/мл.
2.5.4.2. Градуировочный график В (измерение по п. 2.7.2.). Для построения градуировочного графика в инжектор хроматографа вводят по 20 мкл рабочего стандартного раствора квизалофоп-П-тефурила с концентрацией 0,05; 0,1; 0,2; 0,3 и 0,5 мкг/мл.
Осуществляют не менее 5 параллельных измерений. Находят среднее значение высоты (или площади) хроматографического пика для каждой концентрации. Строят градуировочный график (А или В) зависимости высоты (или площади) хроматографического пика в мм (мм2) от концентрации квизалофоп-П-тефурила в растворе в мкг/мл.
2.6. Описание измерения
Фильтр с отобранной пробой переносят в химический стакан вместимостью 100 мл, заливают 10 мл ацетонитрила, оставляют на 5 - 7 мин, периодически перемешивая. Растворитель сливают, отжимая фильтр стеклянной палочкой. Фильтр еще дважды обрабатывают новыми порциями ацетонитрила объемом 10 мл.
Объединенный экстракт упаривают в грушевидной колбе на ротационном вакуумном испарителе почти досуха, оставшийся растворитель отдувают потоком теплого воздуха, остаток растворяют в 1 (измерение по п. 2.7.1) или 10 мл (измерение по п. 2.7.2) подвижной фазы для ВЭЖХ и хроматографируют.
2.7. Условия хроматографирования
2.7.1. Жидкостный хроматограф с ультрафиолетовым детектором Милихом (Россия)
Колонка стальная длина 64 мм, внутренний диаметр 2 мм, заполнение Сепарон С18, зернение 5 мкм.
Температура колонки: комнатная.
Подвижная фаза ацетонитрил-вода (7 : 3, по объему).
Скорость потока элюента 100 мкл/мин.
Рабочая длина волны: 236 нм.
Чувствительность 0,4 ед. абсорбции на шкалу.
Объем вводимой пробы 10 мкл.
Время выхода квизалофоп-П-тефурил около 6 мин.
Линейный диапазон детектирования: 5 - 150 нг.
Образцы, дающие пики большие, чем стандартный раствор с концентрацией 15 мкг/мл, разбавляют подвижной фазой для ВЭЖХ.
2.7.2. Жидкостный хроматограф с ультрафиолетовым детектором Perkin-Elmer (США)
Колонка стальная длина 25 см, внутренний диаметр 4,6 мм, заполнение Hipersil ODS, зернение 5 мкм.
Температура колонки комнатная.
Подвижная фаза ацетонитрил-вода (7 : 3, по объему)
Скорость потока элюента 1 мл/мин
Рабочая длина волны 236 нм
Чувствительность 0,05 ед. абсорбции на шкалу
Объем вводимой пробы 20 мкл
Время выхода квизалофоп-П-тефурила около 12 мин
Линейный диапазон детектирования 1,0 - 10 нг
Образцы, дающие пики большие, чем стандартный раствор с концентрацией 0,5 мкг/мл, разбавляют подвижной фазой для ВЭЖХ.
2.8. Обработка результатов анализа
Содержание квизалофоп-П-тефурила рассчитывают методом абсолютной калибровки по формуле:
,
где
Х - содержание квизалофоп-П-тефурила в пробе воздуха, мг/м3;
С - концентрация квизалофоп-П-тефурила в хроматографируемом растворе, найденная по калибровочному графику, мкг/мл;
W - объем экстракта, подготовленного для хроматографирования, мл;
V - объем пробы воздуха, отобранного для анализа, приведенного к стандартным условиям (давление 760 мм рт. ст., температура 20 °С), дм3.
,
где
Т - температура воздуха при отборе пробы (на входе в аспиратор), °С;
Р - атмосферное давление при отборе пробы, мм рт. ст;
и - расход воздуха при отборе пробы, дм3/мин;
t - длительность отбора пробы, мин.
3. Требования техники безопасности
При выполнении измерений концентраций квизалофоп-П-тефурила следует соблюдать все необходимые требования безопасности при работе в химических лабораториях в соответствии с «Правилами устройства, техники безопасности, производственной санитарии, противоэпидемиологического режима и личной гигиены при работе в лечебных и санитарно-эпидемиологических учреждениях системы МЗ СССР» (№ 2455-81 от 20.10.81), а также требования, изложенные в документации на прибор.
4. Разработчики
Ракитский В.Н. член-корр. РАМН, проф., Юдина Т.В., Федорова Н.Е. (Федеральный научный центр гигиены им. Ф.Ф. Эрисмана, г. Мытищи Московской обл., ул. Семашко, д. 2).
Телефон: (095) 586-12-76.
СОДЕРЖАНИЕ
|
2.3. Приборы, аппаратура, посуда. 3 2.5. Подготовка к определению.. 3 2.7. Условия хроматографирования. 4 2.8. Обработка результатов анализа. 5 |