Государственное
санитарно-эпидемиологическое нормирование
Российской Федерации
4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ
Измерение концентраций 6-метилпиколиновой кислоты методом высокоэффективной жидкостной хроматографии в воздухе рабочей зоны
МУК 4.1.245-96
Минздрав России
Москва 2000
1. Методические указания по измерению концентрации вредных веществ в воздухе рабочей зоны (выпуск 30) разработаны с целью обеспечения контроля соответствия фактических концентраций вредных веществ их предельно допустимым концентрациям (ПДК) и ориентировочно безопасным уровням воздействия (ОБУВ) - санитарно-гигиеническим нормативам и являются обязательными при осуществлении санитарного контроля.
2. Методические указания по измерению концентраций вредных веществ в воздухе рабочей зоны утверждены и. о. Председателя Госкомсанэпиднадзора России - заместителем Главного государственного санитарного врача Российской Федерации 8 июня 1996 г.
3. Введены впервые.
4. Включенные в данный выпуск 74 методики контроля вредных веществ в воздухе рабочей зоны разработаны и подготовлены в соответствии с требованиями ГОСТа 12.1.005-88 ССБТ "Воздух рабочей зоны. Общие санитарно-гигиенические требования", ГОСТа 12.1.016-79 ССБТ "Воздух рабочей зоны. Требования к методикам измерения концентраций вредных веществ" и ГОСТа Р 1.5-92 п. 7.3.
Методические указания одобрены на совместном заседании группы Главного эксперта Федеральной комиссии по санитарно-гигиеническому нормированию "Лабораторно-инструментальное дело и метрологическое обеспечение" и методбюро п/секции "Промышленно-санитарная химия" Проблемной комиссии "Научные основы гигиены труда и профпатологии".
Ответственные исполнители: Г. А. Дьякова, C. И. Муравьева
Исполнители: Г. А. Дьякова, Н. С. Горячев. Л. Г. Макеева, Г. В. Муравьева, Е. М. Малинина, Е. В. Грыжина, Е. Н. Грицун.
УТВЕРЖДЕНО
И. о. Председателя Госкомсанэпиднадзора
России - заместителем Главного
государственного санитарного врача
Российской Федерации
Г.Г. Онищенко
8 июня 1996 г.
МУК 4.1.245-96
Дата введения: с момента утверждения
4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ
C7H7NО2 М.м. 137,13
6-метилпиколиновая кислота (МПК) является полупродуктом в синтезе метиоприла.
МПК представляет собой белый кристаллический порошок, хорошо растворим в воде, метаноле, ацетонитриле. Тпл. - 131 °С.
В воздухе МПК находится в виде аэрозоля.
МПК оказывает раздражающее действие на слизистую оболочку глаза, обладает сильным кожно-резорбтивным действием.
ОБУВ в воздухе - 3 мг/м3.
Характеристика метода
Определение МПК в воздухе основано на предварительном концентрировании ее аэрозоля на фильтре, экстракции метанольным раствором гидроксида калия, превращении МПК в п-бромфенациловый эфир и определении массовой концентрации полученного эфира методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) со спектрофотометрическим детектированием.
Нижний предел измерения в анализируемой пробе - 0,01 мкг; в воздухе - 1 мг/м3 (при отборе 5 л воздуха).
Диапазон определяемых концентраций МПК в воздухе составляет от 1 до 30 мг/м3.
Погрешность определения ± 22 %.
Определению не мешают 2,6-диметилпиридин, пиридин-2,6-дикарбоновая кислота.
Длительность анализа, включая пробоотбор, - 3 ч.
Приборы, аппаратура, посуда
Весы аналитические типа ВЛА-200 или ВР-200 |
ГОСТ 24104-80Е |
Меры массы |
|
Жидкостный хроматограф "Милихром" |
|
Колонка аналитическая размером 250 ´ 4 мм, упакованная сорбентом "Separon" с размером частиц 7 мкм или колонка подобного типа |
|
Иономер универсальный типа ЭВ-74 с погрешностью измерения не более 0,05 рН (допускается применение рН-метров с аналогичными метрологическими характеристиками) |
|
Аргон в баллонах |
|
Электроаспиратор ЭА-2С-М1 |
ТУ 2.840.016 |
Фильтры АФА-ВП-20 с фильтродержателем |
ТУ 957181-76 |
Фильтродержатель с нейлоновым фильтром, с диаметром пор 0,45 мкм (МО "Диагностикум") |
|
Аппарат для встряхивания пробирок АВ-30 С |
ТУ 64-1-2451-78 |
Колбы мерные и пипетки |
|
Посуда стеклянная |
ГОСТ 10394-72 ГОСТ 10515-75 |
Флаконы с завинчивающейся крышкой или ампулы |
Реактивы, растворы, материалы
Вода дистиллированная |
|
Ацетонитрил, х. ч. (в качестве элюента используется 27,5 %-ный водный раствор) |
ТУ 6-09-1092-83 |
Метанол, х. ч. |
|
Гидроксид калия, ч. д. а. (используется 0,036 М раствор в метаноле) |
СТ СЭВ 1489-78 |
п-Бромфенацилбромид, ч. (используется раствор в ацетонитриле с концентрацией 3,5 мг/мл) |
ТУ 6-09-3397-73 |
18-Краун-6, ч. (используется 1 мм раствор в ацетонитриле) |
ТУ 6-09-05-946-79 |
6-Метилпиколиновая кислота, содержание основного вещества - 99 % |
Стандартный раствор с концентрацией 100 мкг/мл готовят растворением 10 мг вещества в 100 мл ацетонитрила, срок хранения - неделя.
Подготовка к измерению
Непосредственно перед приготовлением образцов МПК для анализа готовят рабочие растворы гидроксида калия и 18-краун-6 путем разбавления их исходных растворов в 10 раз метанолом и ацетонитрилом соответственно. Срок хранения этих растворов - не более суток.
Разбавлением основного раствора МПК ацетонитрилом готовят калибровочные растворы с концентрациями 0,5; 1; 2; 3; 5; 8; 10 мкг/мл.
Образцы МПК для анализа готовят следующим образом. В флакон с завинчивающейся крышкой помещают 1 мл градуировочного раствора с необходимой концентрацией и растворитель удаляют в потоке аргона при температуре 40-45 °С. К полученному остатку приливают 0,05 мл раствора гидроксида калия, 0,25 мл метанола, закрывают крышкой и встряхивают. Затем метанол удаляют в потоке аргона при температуре 40-45 °С. К полученному остатку приливают 0,08 мл раствора п-бром-фенацилбромида; 0,01 мл раствора 18-краун-6; 0,25 мл ацетонитрила, закрывают крышкой, встряхивают и выдерживают в водяной бане при 80 °С в течение 20 мин. Затем растворитель удаляют в потоке аргона при температуре 40-45 °С. К полученному остатку приливают 1 мл ацетонитрила и фильтруют через нейлоновые фильтры.
Срок хранения образцов - не более суток.
Условия хроматографирования стандартных растворов и анализируемых проб:
подвижная фаза |
27,5 % водный ацетонитрил; |
скорость потока подвижной фазы |
2 мл/мин; |
температура колонки |
50 °С; |
длина волны детектора |
254 нм; |
диапазон УФ-детектора |
0,016 ед. опт. пл.; |
объем пробы |
20 мкл; |
время удерживания производного МПК (п-бромфенациловый эфир) |
18 мин. |
Измеряемым параметром служит площадь хроматографического пика.
На основании полученных данных строят калибровочный график в координатах: концентрация МПК в растворе (мкг/мл) - площадь хроматографического пика (мм2). Каждую точку получают на основании 5 измерений.
Градуировку проводят не реже 1 раза в неделю.
Отбор пробы воздуха
Воздух со скоростью 1 л/мин аспирируют через фильтр, закрепленный в фильтродержателе.
Для определения 1/2 ОБУВ достаточно отобрать 5 л воздуха. Срок хранения отобранной пробы - 3 суток.
Проведение анализа
Для определения массовой концентрации МПК фильтр режут на мелкие кусочки, помещают в флакон на 3 мл, добавляют 0,2 мл раствора гидрооксида калия и полностью заливают метанолом. Затем крышку завинчивают и встряхивают 10-15 мин. Раствор отбирают, помещают в флакон на 10 мл. Эту операцию повторяют 3 раза. Срок хранения объединенного раствора не более суток.
Отбирают 1 мл полученного раствора и анализируют, как описано в разделе "Градуировка".
Если площадь пика МПК более 20000, то пробу разбавляют до той концентрации раствора, площадь пика которого лежит примерно в середине градуировочной характеристики. Определение повторяют 5 раз и полученные значения усредняют. Разброс данных при повторных измерениях не должен быть более 5 %.
Расчет концентрации
Массовую концентрацию МПК (С) в воздухе рассчитывают по формуле:
, где
а - количество МПК по калибровочному графику, мкг/мл;
б - конечный объем экстракта МПК с фильтра, мл;
V - объем пробы воздуха, приведенный к нормальным условиям, л (см. приложение 1).
0,59 - степень извлечения МПК из фильтра.
Методические указания разработаны НИИ медицины труда РАМН, институтом канцерогенеза, г. Москва.
Приведение объема воздуха к стандартным условиям (температуре 20 °С и давление 760 мм рт. ст.)
Приведение объема воздуха к стандартным условиям проводят по формуле:
, где
Vt - объем воздуха, отобранного для анализа, л;
Р - барометрическое давление, мм рт. ст. (760 мм рт. ст. = 101,33 кПа);
t° - температура воздуха в месте отбора пробы, °С.
Для удобства расчета Vст следует пользоваться таблицей коэффициентов (приложение 2). Для приведения объема воздуха к температуре 20 °С и давлению 760 мм рт. ст. (101,33 кПа) надо умножить Vt на соответствующий коэффициент.
Коэффициент К для приведения объема воздуха к стандартным условиям
Давление Р, кПа/мм рт. ст. |
||||||||||
°С |
730 |
734 |
738 |
742 |
746 |
750 |
754 |
758 |
760 |
764 |
-30 |
1,1582 |
1,1646 |
1,1709 |
1,1772 |
1,1836 |
1,1899 |
1,1963 |
1,2026 |
1,2058 |
1,2122 |
-26 |
1,1393 |
1,1456 |
1,1519 |
1,1581 |
1,1644 |
1,1705 |
1,1768 |
1,1831 |
1,1862 |
1,1925 |
-22 |
1,1212 |
1,1274 |
1,1336 |
1,1396 |
1,1458 |
1,1519 |
1,1581 |
1,1643 |
1,1673 |
1,1735 |
-18 |
1,1036 |
1,1097 |
1,1158 |
1,1218 |
1,1278 |
1,1338 |
1,1399 |
1,1400 |
1,1490 |
1,1551 |
-14 |
1,0866 |
1,0926 |
1,0986 |
1,1045 |
1,1105 |
1,1164 |
1,1224 |
1,1284 |
1,1313 |
1,1373 |
-10 |
1,0701 |
1,0760 |
1,0819 |
1,0877 |
1,0986 |
1,0994 |
1,1053 |
1,1112 |
1,1141 |
1,1200 |
-6 |
1,0540 |
1,0599 |
1,0657 |
1,0714 |
1,0772 |
1,0829 |
1,0887 |
1,0945 |
1,0974 |
1,1032 |
-2 |
1,0385 |
1,0442 |
1,0499 |
1,0556 |
1,0613 |
1,0669 |
1,0726 |
1,0784 |
1,0812 |
1,0869 |
0 |
1,0309 |
1,0366 |
1,0423 |
1,0477 |
1,0535 |
1,0591 |
1,0648 |
1,0705 |
1,0733 |
1,0789 |
+2 |
1,0234 |
1,0291 |
1,0347 |
1,0402 |
1,0459 |
1,0514 |
1,0571 |
1,0627 |
1,0655 |
1,0712 |
+6 |
1,0087 |
1,0143 |
1,0198 |
1,0253 |
1,0309 |
1,0363 |
1,0419 |
1,0475 |
1,0502 |
1,0557 |
+10 |
0,9944 |
0,9999 |
1,0054 |
1,0108 |
1,0162 |
1,0216 |
1,0272 |
1,0326 |
1,0353 |
1,0407 |
+14 |
0,9806 |
0,9860 |
0,9914 |
0,9967 |
1,0027 |
1,0074 |
1,0128 |
1,0183 |
1,0209 |
1,0263 |
+18 |
0,9671 |
0,9725 |
0,9778 |
0,9880 |
0,9884 |
0,9936 |
0,9989 |
1,0043 |
1,0069 |
1,0122 |
+20 |
0,9605 |
0,9658 |
0,9711 |
0,9783 |
0,9816 |
0,9868 |
0,9921 |
0,9974 |
1,0000 |
1,0053 |
+22 |
0,9539 |
0,9592 |
0,9645 |
0,9696 |
0,9749 |
0,9800 |
0,9853 |
0,9906 |
0,9932 |
0,9985 |
+24 |
0,9475 |
0,9527 |
0,9579 |
0,9631 |
0,9683 |
0,9735 |
0,9787 |
0,9839 |
0,9865 |
0,9917 |
+26 |
0,9412 |
0,9464 |
0,9516 |
0,9566 |
0,9618 |
0,9669 |
0,9721 |
0,9773 |
0,9799 |
0,9851 |
+28 |
0,9349 |
0,9401 |
0,9453 |
0,9503 |
0,9655 |
0,9605 |
0,9657 |
0,9708 |
0,9734 |
0,9785 |
+30 |
0,9288 |
0,9339 |
0,9891 |
0,9440 |
0,9432 |
0,9542 |
0,9594 |
0,9645 |
0,9670 |
0,9723 |
+34 |
0,9167 |
0,9218 |
0,9268 |
0,9318 |
0,9368 |
0,9418 |
0,9468 |
0,9519 |
0,9544 |
0,9595 |
+38 |
0,9049 |
0,9099 |
0,9149 |
0,9198 |
0,9248 |
0,9297 |
0,9347 |
0,9397 |
0,9421 |
0,9471 |